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目的:揭示前列腺液中EZH2的表达在前列腺癌诊断中可能的临床价值,为非损伤性前列腺癌诊断提供新思路。探索EZH2在去势抵抗性前列腺癌多西他赛耐药中的作用及其机制。方法:收集临床有前列腺穿刺指征的可疑前列腺癌患者的前列腺液,根据病理结果分组;通过RT-PCR及酶联免疫吸附法检测前列腺液中不同分组EZH2的表达水平;分析EZH2在前列腺癌早期诊断中的临床应用价值,以及与临床病理特征之间的关系。通过间断递增浓度的方法构建去势抵抗性前列腺癌多西他赛耐药细胞株PC-3/DR,并应用实时定量PCR和western-blotting(WB)检测细胞株耐药前后EZH2m RNA和蛋白的表达变化。再应用流式细胞仪和MTT检测了EZH2抑制单独或者联合多西他赛对耐药细胞迁移、侵袭、凋亡和增殖能力的影响。然后,通过裸鼠皮下注射PC-3/DR细胞和EZH2稳定转染的PC-3/DR细胞,建立了荷瘤鼠模型,并观察了RNAi联合多西他赛对肿瘤瘤体、荷瘤鼠体重等的影响。最后,应用免疫组化和Western bloting检测了瘤体的EZH2、H3-(me)3-K27和Bcl-2的蛋白表达。结果:前列腺癌组前列腺液中EZH2的浓度显著高于前列腺炎组(P<0.05)、前列腺增生组(P<0.05)和正常组(P<0.001);而前列腺炎组与前列腺增生组及正常组之间无明显差异。前列腺癌患者EZH2表达量与临床分期无关,但不同病理分级之间有显著性差异(P<0.01),EZH2表达越高,前列腺癌分化越低。EZH2m RNA相对定量值的ROC曲线面积高于PSA曲线下面积,当EZH2 m RNA相对含量值取0.66时其诊断效能最高。实时定量PCR和Western bolting结果显示,EZH2在耐药株中的表达水平明显高于非耐药株细胞(P<0.01)。EZH2过表达可促进细胞耐药,而抑制EZH2表达可以逆转耐药(P<0.01)。此外,EZH2表达升高可明显提高细胞的迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖(P<0.01),并且RNAi与多西他赛联合应用后的效果要高于单独应用RNAi或多西他赛(P<0.001)。体内结果表明,抑制EZH2表达可以明显抑制耐药瘤体的生长(P<0.05),此外,联合应用RNAi和多西他赛肿瘤抑制率要高于单一应用(P<0.001)。免疫组化和免疫印迹表明,EZH2被抑制后,肿瘤组织中H3-(me)3-K27和Bcl-2的表达均明显减弱(P<0.01)。结论:前列腺液中EZH2检测对于前列腺癌的早期诊断具有较高的灵敏度和特异性,作为前列腺癌的诊断指标具有较好的发展前景。EZH2表达升高在去势抵抗性前列腺癌多西他赛耐药中发挥着重要作用。抑制EZH2表达可以降低耐药性,且联合应用RNAi和多西他赛逆转耐药结果最明显。EZH2可能是通过调节H3-(me)3-K27和Bcl-2的高表达使细胞产生耐药性。