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研究背景及目的邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)是目前被广泛应用于工业生产和日常消费品中的邻苯二甲酸酯类化合物,是典型的环境内分泌干扰物,人体可通过多种途径和来源暴露于DEHP。大量研究显示,DEHP具有潜在的发育毒性,包括胚胎发育毒性及神经发育毒性。本研究主要探讨孕期DEHP暴露是否能引起胎鼠宫内生长受限,这种不良妊娠结局是否存在敏感期和性别差异以及不同孕期DEHP暴露对子代空间学习记忆能力的影响。方法本研究共分为以下三个部分:第一部分:ICR孕鼠随机分为3组,分别为对照组(单纯玉米油组)、50 mg/kg DEHP组、200 mg/kg DEHP组,按体重的1%于妊娠第0天(Gestational day 0,GD0)对孕鼠进行灌胃处理至GD17,每天记录孕鼠的体重和饲料消耗量。于GD18上午剖杀孕鼠,记录子宫连胎重、死胎数、活胎数以及吸收胎数,称量活胎体重和头臀长,并通过肛殖距辨认胎鼠性别,若肛殖距不能确定胎鼠性别,可通过解剖观察其内生殖器来判断。第二部分:ICR孕鼠随机分为6组,处理组给予200 mg/kg DEHP灌胃处理,处理时间分别为孕早期(GD0-GD6)、孕中期(GD7-GD12)、孕晚期(GD13-GD17),并设置相应的对照组,对照组给予玉米油灌胃处理,每天记录孕鼠的体重和饲料消耗量。孕鼠于GD18上午剖杀,及时记录子宫连胎重、胎盘重、胎盘直径、胎鼠体重和头臀长,并通过肛殖距辨认胎鼠性别,若肛殖距不能确定胎鼠性别,可通过解剖观察其内生殖器来判断,同时也要记录死胎数、活胎数以及吸收胎数等。对胎盘病理切片进行免疫组织化学检测和H&E染色,分别观察Ki67阳性细胞的表达与分布情况及胎盘迷路层的血窦面积比。第三部分:ICR孕鼠随机分为4组,处理组给予200 mg/kg DEHP灌胃处理,处理时间分别为孕中期(GD7-GD12)、孕晚期(GD13-GD17),设置相应的对照组,给予玉米油灌胃处理。孕鼠分娩后,组内调整每窝仔鼠只数,10只/窝,雌雄各半。仔鼠在3周龄时断乳并将雌雄仔鼠分开饲养,每天监测仔鼠的体重变化和进食情况。在仔鼠8周龄时(成年期)进行Morris水迷宫实验,观察成年期子代空间学习记忆能力的改变。结果在第一部分的研究中,对照组、50 mg/kg、200 mg/kg DEHP处理组总胎鼠体重分别为(1.376±0.018)g、(1.271±0.015)g和(1.173±0.026)g,与对照组相比,处理组胎鼠体重均降低,差异具有统计学意义(F=26.826,P<0.01);雌性胎鼠体重分别为(1.341±0.020)g、(1.245±0.020)g和(1.108±0.030)g,与对照组相比,处理组胎鼠体重均降低,差异具有统计学意义(F=25.102,P<0.01);雄性胎鼠体重分别为(1.410±0.016)g、(1.302±0.010)g和(1.220±0.02)g,与对照组相比,处理组胎鼠均体重降低,差异具有统计学意义(P<0.01);另外,处理组胎鼠的头臀长与对照组相比也有显著的降低。在第二部分的研究中,孕早期、孕中期、孕晚期暴露组及对应的对照组胎鼠体重分别为(1.338±0.025)g、(1.312±0.025)g、(1.241±0.023)g和(1.401±0.015)g、(1.401±0.025)g、(1.402±0.025)g,与对照组相比,孕中、晚期胎鼠体重降低,差异具有统计学意义(P<0.01);孕早期、孕中期、孕晚期暴露组及对应的对照组胎鼠头臀长分别为(23.53±0.23)g、(23.27±0.20)g、(23.21±0.21)g和(24.41±0.23)g、(24.42±0.29)g、(24.41±0.22)g,与对照组相比,孕早、中、晚期胎鼠头臀长降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。胎盘重量分别为(0.086±0.003)g、(0.083±0.004)g、(0.086±0.002)g和(0.098±0.005)g、(0.097±0.002)g、(0.097±0.003)g,与对照组相比,孕中期胎盘重量降低,差异有统计学意义(P<0.01);另外,孕中期暴露组的胎盘迷路层血窦面积比及细胞增殖均较对照组降低,而对孕早、晚期暴露组的胎盘影响不明显。在第三部分Morris水迷宫实验中,与对照组相比,孕中期暴露组的成年雌性子代第一天和第三天的潜伏期明显延长,第四天到第六天恢复正常;孕中期、孕晚期暴露组的成年雄性子代第三天的潜伏期明显延长,第四天到第六天恢复正常;第7天孕晚期暴露组的雄性成年小鼠经过目标象限的次数、平均运动距离缩短,潜伏期延长(P<0.05)。结论孕期DEHP暴露可导致胎鼠宫内生长受限,这种损伤在雌雄胎鼠中均有发生,不具有性别依赖性;胎鼠宫内生长受限的敏感期主要在孕中期和孕晚期;孕晚期DEHP暴露可降低雄性子代的记忆能力。