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目的:建立检测小鼠胸腺细胞DNA损伤的方法,并应用此方法探讨苯、苯并(a)芘引起小鼠胸腺细胞DNA损伤及其机制。 方法:运用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)建立检测鼠胸腺细胞DNA损伤的方法,并在此基础上将苯、苯并(a)芘分为三个浓度组,在加或不加代谢活化系统(S9Mix)条件下,测定鼠胸腺细胞DNA的彗星尾长;采用比色法测定不同浓度苯和苯并(a)芘染毒后鼠胸腺细胞NO含量;并在反应体系中加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸,观察鼠胸腺细胞DNA的彗星尾长的变化。 结果:1.当有S9Mix存在条件下,10-6mol/L—10-4mol/L浓度的苯可使彗星拖尾长度明显增加,且呈浓度依赖性。不加S9Mix条件下,10-6mol/L B(a)P浓度组中鼠胸腺细胞DNA彗星拖尾长度与溶剂对照组比较差异无显著性(P>0.05);10-4mol/L、10-5mol/L浓度组鼠胸腺细胞DNA彗星拖尾长度与溶剂对照组比较差异有显著性(P<0.05);加S9Mix条件下,10-6mol/L—10-4mol/L B(a)P浓度组鼠胸腺细胞DNA彗星拖尾长度与溶剂对照组和S9Mix对照组相比较,差异均有显著性(P<0.01),且成剂量—效应关系。 2.在加或不加S9Mix的条件下,10-6mol/L—10-4mol/L浓度的苯对鼠胸腺细胞所产生的NO浓度与溶剂对照比较差异无显著性;10-6mol/L—10-4mol/L浓度的B(a)P对鼠胸腺细胞所产生的NO浓度在各组间比较差异无显著性,而加S9Mix与不加S9Mix两组之间比较差异有显著性(P<0.05)。 3.加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)后,在有S9Mix反应体系中,0.1μmol/L—1.0μmol/L浓度的NAC组与溶剂对照组比较,彗星拖尾长