电针“百会”穴对APP/PS1双转基因小鼠海马区代谢物及空间学习记忆能力的影响

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目的:本研究利用磁共振波谱(Magnetic resonance spectroscopy,MRS)技术观察APP/PS1双转基因小鼠脑内海马区代谢物N-乙酰天门冬氨酸(N-Acetylaspartate,NAA),谷氨酸(Glutamate,Glu),肌醇(myoinositol,mI)的变化,探讨电针"百会"穴对APP/PS1双转基因小鼠空间学习记忆能力的影响及可能的作用机制。方法:36只APP/PS1双转基因小鼠根据随机数字表分为3组,模型组(12只)、电针组(12只)及非穴组(12只),另有12只同窝阴性野生型小鼠随机分入正常组。电针组电针"百会"穴,每天1次,30min/次,疏密波,1/20Hz,持续4周。采用Morris水迷宫及跳台实验评估小鼠空间学习记忆功能;应用MRS观察各组小鼠海马区NAA、Glu、mI代谢的变化,尼氏染色(Nissl’s staining)观察神经元细胞数量变化,以及蛋白免疫印迹杂交技术(Western blotting)检测脑源性神经营养因子(Brain derived neurophicfactor,BDNF)、酪氨酸受体激酶B(Tropomyosin receptor kinase B,TrkB)。结果:1.干预前后Morris水迷宫结果显示:干预前,模型组小鼠与电针组小鼠逃避潜伏期无统计学意义(P>0.05),两组间穿越平台次数无差异(P>0.05);干预后,电针组小鼠逃避潜伏期较模型组缩短,差异有统计学意义(P<0.05),电针组较模型组穿越平台次数增加,差异有统计学意义(P<0.05)。干预前后跳台实验结果显示:干预前,电针组小鼠跳下平台错误次数与模型组小鼠相比无差异(P>0.05),第一次跳下平台潜伏期无统计学意义(P>0.05);干预后,电针组错误次数较模型组显著减少(P<0.01),第一次跳下平台潜伏期延长具有统计学差异(P<0.01)。2.干预前后MRS结果显示:干预前与模型组相比较,电针组小鼠海马区NAA、Glu及mI含量均未见显著差异(P>0.05);干预后电针组小鼠海马区NAA、Glu比值较模型组含量升高(P<0.05)。mI含量在电针与模型两组对比中均无差异(P<0.05)。3.尼氏染色结果显示:电针组小鼠脑内海马CA1、CA3区神经元细胞计数均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.01)。4.Western Blotting结果显示:与模型组小鼠相比,电针组小鼠海马中BDNF、TrkB及其磷酸化形式p-TrkB的表达明显增加(P<0.01)。结论:电针"百会"穴可通过改善海马区NAA和Glu的代谢,同时上调该区域内BDNF及TrkB受体的表达,起到营养神经、保护神经元的作用,可能是电针改善APP/PS1双转基因小鼠空间学习记忆的作用机制之一。
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