波尔山羊精子体外获能及获能前后超微结构的变化

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hujialian
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本文就国内新引进的波尔山羊精子体外获能及获能前后超微结构的变化进行研究。获能处理前先进行活精子分离,然后按实验之需,用含有肝素的培养液获能处理,获能结束后用溶血磷脂酰胆碱(LC)诱导顶体反应,TG染色法测得有顶体反应的活精子作为评价精子获能的指标。肝素添加剂量设5个水平,即0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml;处理时间分4h、3h、2h、1h、15min5个水平;LC处理时间设0min、3min、6min、9min、12min、15min、20min7个水平。电镜样品用常规方法固定、脱水、包埋、聚合,LKB-2088V切片机切片,铀铅片染,JEM-100XII观察,拍照。 结果表明:三种培养液中,从获能效果、精子活力和活精子百分率来考虑,S培养液效果最好,4h的顶体反应率达60.88%,与D、B培养液的获能效果相比,差异极显著(P<0.01),获能4h和6h的效果差异不显著(P>0.05);肝素的添加剂量以15μg/ml和20μg/ml的效果最好,与其它处理组的效果相比差异显著(P<0.05),但这两个水平间的效果差异不显著(P>0.05);LC诱导顶体反应的时间在15min时效果极显著高于15min以下处理组的效果(P<0.01)。羊精子的超微结构与其它哺乳动物的类似,分头、颈、尾三部分。头部主要由细胞核构成,含有遗传物质;颈部脆弱,尾部易从此脱落;尾部由中段、主段和末段组成。精子获能后,顶体质膜膨胀、断裂和丢失;顶体外膜囊泡化,进而顶体内膜裸露。
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