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细胞质雄性不育是油菜杂种优势利用的主要途径和手段,而目前最具应用前景的是萝卜细胞质不育体系。该系统的不育系育性稳定,用来制种安全系数非常高,但其恢复基因仅存在萝卜中,在恢复基因转育时候会携带冗余的萝卜的染色体片段,对油菜品质与农艺性状均产生不利影响。20世纪90年代,法国通过原生质体融合等方法成功育成油菜Ogura-INRA CMS不育系和恢复系,而且恢复基因所携带的萝卜染色体片段得到进一步缩短,实现了该系统杂交种的商业化生产。但该恢复材料已申请了专利保护,限制了我国在萝卜质不育系统的研究和应用发展。本文拟从其他途径获得、鉴定属于我国的新型的萝卜质不育恢复材料,为国内的Ogura-CMS应用创造一个平台。
本研究主要采用的试验材料有CLR650、SR、YR、CR以及7-2140、7-2143、7-7302、7-7304、7-7311、7-7314等材料。为了鉴定恢复材料CLR650是否为新型Ogura CMS恢复材料,本研究采用了分子生物学的研究手段,包括连锁群分析和特异标记分析的方法。为分析恢复材料CLR650的恢复基因的传递情况,利用细胞学观察和花粉管萌发观察的方法。研究结果主要有:⑴CLR650携带的恢复基因位于N19连锁群。虽然国外同类恢复材料的恢复基因也是位于N19连锁群上,本研究中的恢复材料CLR650与国外同类恢复源相比仍有差异,国外的恢复源的恢复基因获得途径均是来自原生质体融合,其恢复功能也完全相同,恢复材料CLR650是通过有性杂交产生的,而且恢复基因的供体材料(萝-蓝,Raphanobrassica,AACCRR,2n=58)也不相同。⑵通过萝卜染色体上与恢复基因连锁的分子标记分析,CLR650与国外同类恢复系的萝卜染色体片段在较多位点上存差异。⑶CLR650的体细胞染色体数目稳定到2N=38条。⑷CLR650转育后代分离比不符合孟德尔分离规律的现象,经细胞学观察推测可能是由于减数分裂染色体联会、分离异常所致。花粉管萌发实验中,恢复材料CLR650和对照材料的花粉管萌发状况基本一致,因此恢复材料CLR650的雄配子活力正常。