酿酒酵母菌关键酶基因剔除对谷胱甘肽及氨基酸合成的影响

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dd1246
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
谷胱甘肽是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸缩合而成的一种同时含有γ-谷氨酰基和巯基的生物活性三肽化合物。谷胱甘肽在生物体内具有多种重要的生理功能,特别是对于维持生物体内适宜的氧化还原环境起着至关重要的作用,在临床医药、食品工业、体育运动及有关生物研究领域有着广泛的用途。γ-胱硫醚裂解酶(γ-CTLase)和β-胱硫醚合成酶(β-CTSase)是酿酒酵母半胱氨酸合成通路上的关键酶,调控两种酶的相应基因分别是CYS3和CYS4;γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶分别是谷胱甘肽生物合成第一步和第二步反应的关键酶,调控两种酶的基因分别是GSH1和GSH2。利用基因重组技术分别构建CYS3基因剔除菌、CYS4基因剔除菌和GSH1基因剔除菌和GSH2基因剔除菌,然后通过对比野生菌与突变酵母菌生长曲线并定量检测两者中谷胱甘肽和氨基酸的含量,得出CYS3基因、CYS4基因和GSH1基因和GSH2基因剔除对谷胱甘肽和氨基酸代谢的影响程度。根据摇瓶实验结果,与野生菌株相比,CYS3基因剔除菌中谷胱甘肽含量降低了26.1%,CYS4基因剔除菌中谷胱甘肽含量提高了6%,GSH1基因剔除菌中谷胱甘肽含量降低了18.5%,GSH2基因剔除菌中谷胱甘肽含量降低了4.17%。这对谷胱甘肽合成工艺提供了理想依据,也就是说CYS4基因突变能提高合成谷胱甘肽的量;而CYS3基因和GSH1基因的剔除使得谷胱甘肽合成量明显下降,提示克隆此两种关键酶做成基因工程菌能显著提高谷胱甘肽合成的产量。综合CYS3、CY4和GSH1、GSH2基因剔除和其它在谷胱甘肽代谢途径中关键酶基因剔除实验结果所得数据,可以建立酿酒酵母谷胱甘肽代谢网络系统生物学模型。
其他文献
目的:探讨双歧杆菌完整肽聚糖(whole peptidoglycan,WPG)对实验性胃癌增殖及凋亡的影响。方法:用胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度WPG与5-氟尿嘧啶(5-FU)移植
糖尿病和肿瘤之间存在密切关系,由于两种疾病发病率的增加,糖尿病合并肿瘤患者的绝对人数亦呈现增长趋势,而由于糖尿病和肿瘤间存在着相互"恶化"的作用,致使患者在治疗实践中
本文选择修正的Gompertz模型和Baranyi&Roberts模型两种初级模型,分别通过Origin8.0软件和DMFit软件,将沙门氏菌在4、7、10、12和15℃鲜猪肉上的生长曲线进行拟合。以平方根
针对黄土高原丘陵沟壑区全膜双垄沟播玉米种植体系中高产高水分利用效率品种相对缺乏的问题,通过大田试验比较研究了先玉335(V1)、郑单958(V2)、金穗1203(V3)、五谷704(V4)、
目的观察纳米四氧化三铁(Fe3O4)双歧杆菌脂磷壁酸(lipoteichoicacid,LTA)对实验性胃癌增殖细胞核抗原(PCNA)和bcl-2、bax蛋白表达的影响。方法用胃癌BGC-823细胞裸鼠皮下移植
目的:研究七氟醚吸入麻醉和氯胺酮静脉麻醉用于小儿短小手术效果的比较。方法:选取我院2012年6月~2015年11月接诊的100例小儿短小手术患儿。随机分组方法:随机数字表法。100例患
采用超声辅助法提取金银花、银杏叶总黄酮以DPPH自由基清除能力为评价指标,分析两种黄酮提取物的协同抗氧化性。试验结果表明,金银花、银杏叶总黄酮对DPPH自由基具有明显的清
目的观察七氟烷吸入麻醉和氯胺酮麻醉用于小儿短小手术的优点。方法80例ASAI-Ⅱ级、1~7岁择期手术患儿,随机分为两组,七氟烷(S)组和氯胺酮(k)组,每组40例。S组吸入七氟烷,k组单用氯胺
在出纳实务课程教学中进行德育渗透有利于落实"立德树人"根本任务,培养财会毕业生职业道德素养。针对出纳实务课程德育缺失的现状,结合该课程授课内容,从理想信念、传统文化
【正】 “激流三部曲”是巴金先生的代表作,特別是“家”又被共認为其中最好的一部。它在一定程度上暴露了封建社会的黑暗,揭开了地主大家庭的腐朽、堕落、互相倾轧的黑幕,控