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第一部绝经后妇女血清FSH与儿茶酚胺和血压水平相关性目的:了解绝经后妇女血清FSH水平与儿茶酚胺水平相关性。材料和方法:收集来我院进行体检,没有基础疾病及内分泌疾病,过去三个月没用过激素类药物治疗的绝经后妇女,严格按照最新妇女生育老化STRAW+10进行分级,将她们分为Stage+1a+1b, Stage+1c绝经后及育龄期Stage-4,-3b三组。记录她们的身高、体重、腰臀比、血压等指标,利用HPLC-ECL法检测血清中的儿茶酚胺的水平,用免疫学方法检测血清中的性激素六项,其血脂水平来自于浙江大学医学院附属妇产科医院化验室检测结果。结果:1.绝经后血清中儿茶酚胺水平增加,与血清FSH和E2水平相关。2.绝经后妇女Stage+1a+1b血清儿茶酚胺水平升高最明显,此时期血压升高也最明显。3.绝经后妇女血清中儿茶酚胺的浓度与FSH的浓度成中度正相关。结论:绝经后妇女血清中儿茶酚胺,尤其是去甲肾上腺素水平与血清FSH水平正相关。第二部分大鼠动物模型血清FSH水平与儿茶酚胺和血压的关系目的:了解去势动物血清FSH水平与儿茶酚胺水平的关系。材料和方法:应用SD大鼠分别建立四种动物模型:假手术组、卵巢去势组、肾上腺切除+皮质酮及醛固酮渗透泵植入组、卵巢去势+肾上腺切除+皮质酮及醛固酮渗透泵植入组及卵巢去势+GnRHa注射组,并注射人重组卵泡刺激素和或17β雌二醇。注射后14天后检测动物收缩压、舒张压、平均动脉压及心率、血清性激素含量及血清儿茶酚胺水平。5个月后行肠系膜张力试验,观察小动脉收缩功能。结果:发现:1.卵巢去势大鼠较假手术组血清FSH水平及血清儿茶酚胺水平均明显升高,血压水平也呈增高趋势。2.卵巢去势+肾上腺切除+皮质酮及醛固酮渗透泵植入组大鼠血清FSH水平升高,血清儿茶酚胺水平升高不明显,血压水平也无明显增高趋势。3.卵巢去势+GnRHa注射组大鼠血清FSH水平及血清儿茶酚胺水平均无明显升高,血压水平也无明显增高趋势。4.卵巢去势大鼠注射雌激素不能完全纠正血清FSH水平及血清儿茶酚胺水平升高,也不能完全纠正升高的血压。5、卵巢去势+GnRHa注射组大鼠注射外源FSH后,血清儿茶酚胺水平及血压水平均明显升高。4.大鼠肠系膜功能实验表明:不论补充雌激素与否,血清FSH水平高大鼠其肠系膜收缩功能均明显降低。结论:卵巢去势大鼠血压升高与血清儿茶酚胺水平升高有关,肾上腺髓质依赖性的儿茶酚胺水平升高与血清FSH水平升高有关。第三部分FSH促进肾上腺髓质细胞合成儿茶酚胺的细胞内机制目的:证实FSHR在肾上腺髓质嗜铬细胞表达,FSH可以通过与FSHR结合促进儿茶酚胺合成。探讨FSH促进肾上腺髓质嗜铬细胞合成和分泌儿茶酚胺的细胞内机制。材料和方法:应用RT-PCR、western blot及免疫荧光技术检测FSH受体在大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞系(PC12)、大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞及人肾上腺髓质嗜铬细胞膜上表达。应用反相高效液相电化学法及活细胞工作站实时图像分析法检测FSH对PC12细胞及大鼠肾上腺原代髓质嗜铬细胞合成儿茶酚胺的影响。应用FSHR特异的siRNA转染的方法建立细胞体外敲除模型。应用腺病毒转染技术构建FSHR高表达细胞模型。用western-blot方法及免疫荧光技术对FSH促进儿茶酚胺合成有关的激酶活性进行检测。结果:1.FSH受体在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞、大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞及人肾上腺髓质嗜铬细胞表达。2.FSH可以促进PC12细胞及大鼠肾上腺髓质原代嗜铬细胞合成去甲肾上腺素和或肾上腺素。3.FSH作用于FSHR通过Gsa激活PKA、ERK1/2、JNK使得下游信号分子磷酸化,主要通过激活p-CREB、p-c-jun、 p-ERK及p-AKT调节儿茶酚胺的合成。结论:FSHR在肾上腺髓质嗜铬细胞瘤表达。FSH通过激活FSHR促进PC12细胞及大鼠肾上腺髓质原代嗜铬细胞合成去甲肾上腺素和或肾上腺素。FSH主要通过激活p-CREB、p-c-jun、p-ERK及p-AKT通路调节儿茶酚胺的合成。