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研究背景及目的:2020年最新癌症统计数据显示乳腺癌已成为全球发病率最高的恶性肿瘤。其中占比10%～17%的三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer,TNBC）具有侵袭性强及预后不良的特点[1],由于缺乏有效的治疗靶点,因此无论是手术、化疗还是免疫疗法,临床疗效均不容乐观。传统观点认为长链非编码RNA（lnc RNA）是一类长度超过200个核苷酸、没有蛋白编码能力的RNA转录本[2],但最新的研究显示有些lnc RNA具有编码功能[3]。目前已经发现多种lnc RNA参与TNBC的发生发展,有望成为治疗TNBC的新靶点。Lnc RNA HCP5是长非编码RNA人组织相容性白细胞抗原HLA和P5的复合物,主要在免疫细胞中表达[4]。研究表明,HCP5在肝细胞癌、肺腺癌及卵巢癌中表达异常[5-7]。本课题旨在探讨lnc RNA HCP5及其编码蛋白在TNBC中的作用及调控机制,为TNBC的的诊疗提供新的理论支持。研究方法:（1）应用荧光定量PCR技术分析lnc RNA HCP5在正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中的表达量。（2）应用RNA Scope技术分析HCP5在癌旁对照乳腺组织及乳腺癌组织中的表达。（3）CCK-8实验和细胞存活/死亡实验分析敲低HCP5对TNBC细胞增殖和存活能力的影响。（4）利用RNA测序技术分析HCP5敲低后发生差异表达的基因,并用抗体芯片和Western blot实验进行验证。（5）裸鼠体内实验分析敲低HCP5对TNBC成瘤能力的影响。（6）生物信息学方法预测HCP5的编码能力及编码蛋白。（7）利用免疫组化实验分析HCP5编码蛋白在癌旁对照乳腺组织以及乳腺癌组织中的表达,并进行临床病理特征的相关性分析。（8）Western blot实验分析HCP5编码蛋白在乳腺癌细胞系中的表达,通过核质分离技术对HCP5编码蛋白进行亚细胞定位。（9）流式细胞术观察敲低和过表达HCP5编码蛋白对TNBC细胞增殖、迁移、凋亡和周期的影响。（10）RNA测序技术分析敲低HCP5编码蛋白后发生差异表达的基因,并进行通路富集分析。（11）流式细胞术和激光共聚焦实验观察敲低HCP5编码蛋白后,加入铁死亡刺激剂和抑制剂引起细胞脂质ROS含量的变化。（12）电镜技术观察HCP5编码蛋白表达改变后,加入铁死亡刺激剂细胞线粒体形态的改变。（13）铁离子检测实验观察敲低HCP5编码蛋白后加入铁死亡刺激剂和抑制剂,细胞内Fe2+浓度的变化。（14）Western blot实验分析HCP5编码蛋白在乳腺癌细胞系中的表达以及铁死亡通路中相关蛋白的表达。（15）裸鼠体内实验观察敲低HCP5编码蛋白后加入铁死亡刺激剂对TNBC成瘤能力的影响。研究结果:（1）Lnc RNA HCP5在TNBC细胞系和癌组织中均呈高表达。（2）敲低HCP5可以抑制TNBC增殖和异体移植瘤的生长。（3）敲低HCP5促进TNBC细胞凋亡,引起凋亡抑制因子BIRC3表达降低、caspase-3表达增加。（4）Lnc RNA HCP5具有编码能力,可以编码一段长度为132个氨基酸的蛋白,我们将其命名为HCP5-132aa。（5）HCP5-132aa在TNBC组织和TNBC细胞系中呈高表达。（6）敲低HCP5-132aa基因可以抑制TNBC细胞的增殖和迁移、促进凋亡和铁死亡。（7）裸鼠体内实验证实,敲低HCP5-132aa基因可以协同铁死亡刺激剂抑制肿瘤生长。结论:Lnc RNA HCP5通过凋亡途径促进TNBC的恶性进展,且lnc RNA HCP5能够编码蛋白HCP5-132aa,HCP5-132aa通过调控细胞凋亡和铁死亡促进TNBC恶性进展。本研究揭示了lnc RNA HCP5及其编码蛋白在TNBC中的作用及调控机制,为临床寻找TNBC新靶点提供研究基础。