枸杞多糖对己烯雌酚致成年雄性仓鼠生精损害的缓解作用及机理研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:tang070932
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本实验旨在研究己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)对成年雄性仓鼠生殖损伤的作用机制及枸杞多糖(Lyciumbar barum polysaccharide,LBP)的缓解作用。将66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A),DES组(B),1mg/kg、10mg/kg及50mg/kg LBP组(C,D,E)及VC+VE组(F)(n=11)。除对照组外,其余5组均皮下注射己烯雌酚,对照组注射等剂量的橄榄油,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌胃1、10、50mg/kg的LBP,F组灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE,A、B组灌服等剂量的生理盐水。于末次给药24h后,乙醚麻醉仓鼠,心脏采血,分离血清,分别用于氧化指标SOD、GSH-Px、MDA及激素T、LH、FSH的检测;分别摘取两侧睾丸、附睾、精囊腺,迅速去除周围脂肪及结缔组织称量并计算脏器指数;于波恩氏液固定睾丸制成切片观察组织学变化,并进行免疫组化Bax、Fas、FasL及Caspase-3的检测;取睾丸迅速保存于液氮中进行RT-PCR及Western-blot检测,确定Bcl-2、Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表达。结果显示DES显著降低仓鼠体重、器官重量及器官指数,而10/50mg/kg LBP及维生素对其有显著缓解作用(P<0.05);DES处理组仓鼠睾丸组织结构严重损伤,LBP作用后其损伤显著减轻,其中以10/50mg/kg LBP的作用最为明显,VC+VE也对其有的缓解作用,且50mg/kg LBP组与VC+VE组无显著差异。通过免疫组织化学、RT-PCR及Western-blot的方法检测睾丸组织Bcl-2、Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表达,结果显示DES显著降低Bcl-2的表达(P<0.01),提高Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表达(P<0.05);给予不同剂量的LBP后,Bcl-2的表达呈剂量依赖性增加,以50mg/kg LBP增加最为显著(P<0.01),Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表达呈LBP剂量依赖性降低,以50mg/kg LBP组表达最低(P<0.01);与VC+VE组相比,50mg/kg LBP对凋亡蛋白的调节作用差异不显著;在抗氧化指标检测中,DES显著性降低血清SOD、GSH-Px水平(P<0.01),增加MDA水平(P<0.01);补充不同剂量的LBP后,血清SOD、GSH-Px水平增加(P<0.01),而MDA水平下降(P<0.01),VC+VE组对机内抗氧化指标的作用要优于LBP组;对血清生殖激素的检测发现,血清FSH、LH和T的水平在DES作用下降低(P<0.01);而LBP对血清中激素的水平有不同程度的提高,其中以50mg/kg作用最显著(P<0.01)。结论:本实验证实,DES通过降低机体抗氧化酶活性,扰乱生殖内分泌系统,激活体内的生殖凋亡途径导致成年雄性仓鼠生殖损伤;补充不同剂量的LBP后,LBP降低睾丸组织的脂质过氧化水平,升高抗氧化酶活性;提高生殖激素FSH、LH和T的水平;抑制Bax、Fas、FasL及Caspase-3凋亡因子的表达,而促进Bcl-2的表达,结果提示10mg/kg或50mg/kg LBP能够有效缓解DES诱导的成年雄性仓鼠的生殖损伤。
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