PCR仪温度检测及校准规范研究

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聚合酶链式反应又称PCR反应,是一种体外快速扩增特定DNA基因片段的分子层面的生物学技术。PCR仪是一种能模仿人体为基因扩增提供所需温度环境的先进的、应用极为广泛的仪器。被广泛应用于生命科学研究、生化分析、临床诊断、药物分析等各个需要基因克隆和制造突变的领域中。课题针对PCR仪的温度检测和校准进行研究,设计了一套基于多传感器融合技术的PCR仪温度校准系统,系统的温度校准不确定度优于0.03℃,并开发了基于LabVIEW软件平台的温度检测校准软件,能自动生成检测报告。在校准实验的基础上研究PCR仪温度校准规范的编写。主要工作如下:(1)概述了PCR反应的基本原理及PCR仪的热循环,阐述了温度对PCR反应的影响和国内外PCR仪温度检测的研究现状,并提出了课题需要研究的内容和方法。(2)通过对PCR仪基座稳态温度场的有限元仿真和实测结果的联合分析,总结了基座温度分布趋势,确定了基座温度信号检测点,制定出PCR仪温度多点实液校准方案,并引入多传感器融合技术,提出了基于加权均值的分批估计数据融合处理算法,在PCR仪温度校准上得到良好的应用效果。(3)设计了校准系统硬件平台,研发了一套基于LabVIEW平台的PCR仪温度自动校准软件,实现了温度准确性、均匀性和升降温速率等各个温度参数的校准和检测报告生成等功能。对实验室常用的PCR仪进行了校准实验,进行了各个温度参数的校准结果讨论,并对测量系统和示值误差结果分别进行了不确定度评定。(4)结合棉花最佳退火温度探讨,介绍了校准系统在生命科学研究方面的一个简单的应用。并对PCR仪温度校准规范进行了研究与编写。
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