神经生长导向因子Slit和Sema3A在鸡胚脊髓表达的比较和意义

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在神经发育和再生的研究中发现,神经再生过程往往重复发育阶段的许多特征,因此,研究神经发育机制有助于了解神经再生过程。在神经细胞发育和再生的过程中,神经突起特别是轴突的生长具有严格的方向性,以建立特定的突触联系,确保正常发育和有效再生。所以研究神经生长的导向机制具有重要意义。 在神经发育或再生时,其突起末端膨大呈扇形,称生长锥。神经突起的生长延伸仅发生在生长锥。生长锥的功能与神经突起的生长、轴突特殊路径的选择、靶细胞的识别和突触的形成有关。生长锥的活动受多种因素的影响,近年来的研究表明,生长锥之所以能沿特殊的途径延伸,是受多种信号分子调控的。生长锥通过其表面的受体识别这些信号分子,引导轴突沿一定方向生长。 Slit和Sema3A是近年来发现的两种重要的神经生长导向因子。Slit的功能广泛而复杂,它不仅对轴突生长具有导向作用和抑制作用,对神经元迁移也有导向作用,所以它不仅是一个轴突导向因子,而且是一个真正意义上神经生长导向因子和神经生长抑制因子。目前已有实验证明,Slit能导致体外培养的嗅球神经元轴突生长锥萎缩,并抑制其生长;对运动神经元轴突生长具有排斥性导向作用。另外发现,Slit能促进背根神经节(Dorsal root ganglia,DRG)轴突的延伸和分枝。Sema3A是Semaphorins家族中的一员,它既是可扩散的分泌蛋白,同时也是跨膜蛋白。实验证明,Sema 3A能导致体外培养鸡胚背根神经节轴突生长锥发生萎缩。在神经系统发育过程中,导向蛋白Semaphorins起化学排斥作用,调节轴突的生长方向,抑制轴突的分枝和防止轴突进入某些特定的靶区。 为了进一步探讨神经生长导向因子Slit和Sema3A在鸡胚脊髓中的表达模式对神经轴突生长的导向作用,以及脊髓损伤修复和神经再生的机制,我们通过制备地高辛标记的RNA探针,应用原位杂交技术检测并比较了Slit和Sema3A基因mRNA在鸡胚不同发育期脊髓中的表达情况。实验结果表明:Slit基因mRNA在鸡 甫京医科大学硕士学位论文胚脊髓的表达呈现中线和背侧优势,而Sema3A基因在鸡胚脊髓的表达呈现腹侧优势;提示Sema3A和 Slit在鸡胚脊髓发育期轴突投射和神经通路形成中起重要作用。在不同发育期,Slit基因在鸡胚脊髓中线结构处的表达对决定神经轴突是否穿越中线以及轴突的纵向投射模式可能具有重要作用;而 SIi t基因在脊髓后角的表达可能与其排斥和抑制此期运动神经元轴突进入脊髓后角有关,同时该基因在此的表达与其促进背根神经节发育过程中的NGF敏感性轴突生长和分枝作用是一致的。通过比较Slit和Sema3A在鸡胚脊髓中的表达模式,提示Sema3A基因可能通过选择性排斥那些在正常情况下投射到脊髓背侧的轴突来调控背根节感觉神经元在脊髓的投射路径。
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