猪组织中30种β-受体激动剂和阻断剂残留量检测方法的建立

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β-受体激动剂(β-agonists)和β-受体阻断剂(β-blockers)是一类具有苯乙醇胺结构的肾上腺素类合成药物,临床上主要用于治疗支气管哮喘、痉挛、高血压等症状。这类药物结构中的活性基团,在动物体内能结合组织细胞膜中的β-受体,从而发生一系列生理效应,可以促使平滑肌扩张,增加肺活量,同时干扰胰岛素的释放,加快体内糖原和脂肪的分解。在动物饲养过程使用这类药物,可提高饲料的转化率,达到营养再分配的作用,进而明显提高动物的瘦肉率,这类药物又称为―瘦肉精‖。食品中残留的瘦肉精对人体会造成严重的危害,近20年来,世界上多个国家和地区都陆续发生了瘦肉精中毒事件,世界上多个国家也已禁止瘦肉精用于动物饲养。我国政府自1997年就陆续出台政策,不允许在动物饲养过程中使用瘦肉精,并建立了相应的监控管理机制,2011年又公布了瘦肉精专项整治方案,以加强食品中瘦肉精监查的力度,但仍有部分新型药物缺少检测方法,及其它同类药物替代使用等问题。这些都迫切需要建立一种基于该类化学物质性质特点,适用范围更广,效率更高的检测技术。本文通过研究β-受体激动剂和阻断剂类药物的化学性质特点,建立了液相色谱串联质谱法测定猪尿、猪肝、猪肉中30种β-受体激动剂和阻断剂类药物残留量的方法。β-受体激动剂和阻断剂类药物为中等强极性化合物,其结构中含-NH基团,在ESI离子源正模式电离下易得到H+,形成稳定[M+H]+峰,二级子离子扫描,准分子离子峰容易脱去水分子,以及-NH侧链烷烃断裂,苯环结构丢失卤素元素或羟基结构,形成丰富的特征离子,其中[M+H-H2O]+丰度最高。30种β-受体激动剂和阻断剂类药物极性跨度大,在强碱性条件下电离常数较为接近,选择超高压液相色谱仪和末端封合的C18色谱柱分离,在缓慢提升洗脱强度下,30种化合物得到了快速有效的分离。试验发现,葡萄糖苷酸酶在55℃下酶解4 h对β-受体激动剂和阻断剂类药物酶解作用效果和传统的37℃酶解16 h相当。试验比较了不同固相萃取柱和萃取条件,MCX固相萃取小柱适合猪尿、猪肝、猪肉中30种待测物纯化和富集。本文建立的30种β-受体激动剂和阻断剂类药物残留量的快速测定方法,在3种样品中定量限为0.1~1.0μg/kg,回收率在60.0%~120.0%之间,相对标准偏差在0.8%~19.6%范围内。该方法分析用时短,定性定量可靠,可用于猪尿、猪肝、猪肉中30种β-受体激动剂和阻断剂类药物残留量的测定。
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