【摘 要】
：
目的:构建搭载紫杉醇的免疫相容性的弹性多肽（ABD-iTEPA）纳米颗粒靶向给药系统,通过体外抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,评估纳米药物HSA-ABD-iTEPA-PTX抑制乳腺癌细胞效果。方法:通过本实验室经基因工程技术设计合成的cDNA,经转染,转录及翻译制备免疫相容性的弹性多肽（albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polype
论文部分内容阅读
目的:构建搭载紫杉醇的免疫相容性的弹性多肽（ABD-iTEPA）纳米颗粒靶向给药系统,通过体外抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,评估纳米药物HSA-ABD-iTEPA-PTX抑制乳腺癌细胞效果。方法:通过本实验室经基因工程技术设计合成的cDNA,经转染,转录及翻译制备免疫相容性的弹性多肽（albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide,ABD-iTEPA）,并与改造合成的紫杉醇（PTX-LEV-EMCH）通过巯基连接自组装形成纳米药物颗粒（albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide nano-particles,ABD-iTEPA-PTX NPs）;利用亲水端的白蛋白结构域（albumin-binding domain,ABD）与人白蛋白（human serum albumin,HSA）结合形成纳米药物（human serum albumin albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide PTX-LEV-EMCH nano-particles,HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs）。通过Nano Brook Omni对纳米药物粒径大小和Zeta电势测定以及透射电镜进行鉴定,通过Nano Measurer随机计数TEM图像中纳米药物的粒径分布对其进行结构确证。利用紫外分光光度仪建立紫杉醇标准曲线并检测纳米药物中紫杉醇的包封率及上载率。通过模拟正常人体组织内环境及酸性肿瘤周围组织环境的差异对载药纳米粒进行药物体外酸性释放检测。以体外培养MCF-7乳腺癌细胞为模型,采用CCK-8法考察ABD-iTEPA-PTX NPs体外抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,评估纳米药物HSA-ABD-iTEPA-PTX抑制乳腺癌细胞效果。结果:编码纳米载体多肽的cDNA经DH5α感受态细胞转染后提取质粒测量OD260/OD280为2.073±0.043浓度为104.05 ug/m L±9.95 ug/m L;提取质粒测定序列与原质粒序列比对重复性＞98%,经BL21感受态细胞表达后每升TB培养液可提取139.17 mg±7.42 mg载体多肽。合成的纳米药物ABD-iTEPA-PTX NPs粒径大小为87.09 nm±7.63 nm（PDI:0.20）;其携带电荷电位未显示;HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs粒径大小为117.24 nm±5.42 nm（PDI:0.28）,其携带电荷电位为-21.26 m V±1.37 m V。电镜下的HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs呈典型椭圆球状的形态。建立的紫杉醇标准曲线为:Y=0.2173 X+0.0064（R2=0.9999）,在1.875～7.5μg/m L浓度范围内,线性关系良好。ABD-iTEPA-PTX NPs包封率和上载率分别为52.52%和19.11%。HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs在肿瘤的酸性微环境里有较高的释放率;制备的ABD-iTEPA及HSA-ABD-iTEPA纳米载体31.25-500μg/m L下未观察到明显的细胞毒性。HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs与白蛋白结合型紫杉醇相比对乳腺肿瘤MCF-7细胞增殖有显著抑制,药物浓度在2.5～40μg/m L细胞抑制率显著高于白蛋白结合型紫杉醇（P＜0.05）,IC50为9.205μg/m L。结论:成功构建了免疫相容性的弹性蛋白多肽搭载紫杉醇的自组装新型纳米颗粒（HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs）,并建立了MCF-7乳腺癌细胞模型。体外细胞毒性试验结果显示纳米药物载体具有良好的生物相容性,HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs具有良好的杀伤乳腺癌肿瘤细胞的能力。为进一步研究HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs小鼠体内试验及临床试验奠定基础。
其他文献
地下空间是重要的国土空间资源之一。地下空间开发的适宜性不仅受地下空间开发难易程度影响，还与城市经济社会发展水平相关。影响地下空间开发的因素众多，以江苏省泰兴市为例，从内部制约因素出发，采用基于负面清单的综合指数评价法，将评价指标根据重要性程度分成限制性因素、约束性因素和影响性因素3类，建立了基于地质环境条件的地下空间资源难度评价体系，依据不同的开发深度及施工方式，针对性地分析地下空间开发难度；再结
近年来，青少年心理健康问题的研究不断深入，职业高中学生的心理健康受到人们的普遍注意。以齐齐哈尔市三所职业高中学校学生为研究对象，采用王极盛教授编制的中学生心理健康量表（MSSMHS）作为测量工具进行心理健康状况调查。调查研究中齐齐哈尔市职高学生心理问题的总检出率为38.2%,其中中度以上心理问题占5.6%。总检出率较高，但中度以上心理问题检出率较低，总体情况良好。各维度方面，学习压力均分最高，其次
目的 探讨传染性单核细胞增多症（IM）患儿外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值和血清白细胞介素-6 （IL-6）水平的变化及临床意义。方法 选取2020年6月至2021年6月汉中市人民医院收治的51例感染EB病毒的IM急性期患儿作为研究组，并选取同期51例正常体检儿童作为对照组。研究组患儿均给予抗病毒、抗炎等对症治疗，于治疗前（急性期）、治疗后（恢复期：病程满1个月）均采取血液样本检测外周血
家庭教育是一种相对学校教育、社会教育而言重要的教育形式。家庭教育的成功与否将关系到下一代人的素质高低，从而影响到整个社会的发展进程。本文首先指出家庭教育存在的问题，即偏重智育，忽视对孩子道德教育的培养；娇宠溺爱，给予过多的关心和帮助；关注身体发育，忽视心理健康以及对孩子施加过多的压力。然后针对以上问题提出了我国目前在家庭教育问题方面的对策：提高认识、更新观念、提高家长素质、加强家庭教育指导。
随着互联网信息技术的不断发展和广泛应用，现代化的教学手段和方法逐渐融入高校的课堂教学中，借助一些智慧教学软件及平台，打造线上线下混合式教学成为高等教育改革的必然趋势。该文基于《自然地理学》课程的特点，结合新疆农业大学的实际情况，围绕着“教”“学”“管”“评”等几个环节，探讨了《自然地理学》课程线上线下混合式教学的设计及应用，分析其存在的问题，并提出了相应的解决建议，以期提升高校《自然地理学》的教学
东北红豆杉（Taxus Cuspidata）是世界上濒临灭绝的珍贵树种,被我国列为一级保护植物,其枝皮中含有一种萜类化合物——紫杉醇,具有明显的抗癌效果。因此合理利用东北红豆杉生产紫杉醇是我国近年来研究的热门课题。由于其枝皮中紫杉醇的含量很低,通过直接提取法、化学合成法、发酵法等均有一定的弊端,因此,利用悬浮细胞培养技术来高效生产紫杉醇具有重要的现实意义。本文主要以东北红豆杉半木质化的外植体幼茎作
《红楼梦》是我国古典文学史上里程碑式的作品,直到如今,仍是人尽皆知的国民级IP。随着高速发展的社会带来先进的互联网技术和多元的大众传播媒介,对传统文化的传播与发展带来了巨大的机遇与挑战。如何运用现代设计思维和艺术表现,让传统文学作品以新的视觉语言走进大众视野,是一个值得探讨的话题。现代插画多元化的艺术效果和无可比拟的观赏性,给大众带来了大量与《红楼梦》文化相关的二创作品,但一定程度上缺乏对艺术内涵
随着“互联网+”经济体的迅速发展,平台型企业社会责任的信息披露越来越受到社会公众的关注。与此同时,平台型企业所披露的履责信息真实性常常遭遇多方质疑,因此关于平台型企业社会责任信息披露的可靠性有必要进行深入探究。由于平台型企业商业模式的特殊性,平台型企业所需要履行的社会责任范围相比传统企业要更广,信息披露对象也更广,平台型企业在进行社会责任信息披露过程中,其披露方式和披露途径也因为近些年全媒体时代的
目的 探讨新吴区2016—2020年水痘突发公共卫生事件流行病学特征，为制定防控措施提供科学依据。方法 根据《中国疾病预防控制信息系统》中《突发公共卫生事件管理信息系统》及《江苏省疫苗管理信息系统》的数据资料，采用描述性流行病学方法，使用SPSS软件进行分析。结果 2016—2020年，新吴区共报告35起水痘突发事件，占全区同期传染病突发公共卫生事件的57.38%;共报告病例1 033例，罹患率1
英语作为初中阶段的一门重要学科,承担着英语思政教育的重要使命。在课程思政视域下,应实施有效的英语教学设计。在初中英语教学中,可通过教材内容渗透、话题专题拓展、热点主题聚焦、实践活动体验四种方式进行教学设计。