匙羹藤总皂苷提取与分离纯化的研究

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匙羹藤作为一种广泛分布于我国南方各省区的亚热带植物,其活性成分-匙羹藤总皂苷具有预防和治疗糖尿病的功效。本课题以匙羹藤为研究对象,以其有效成分匙羹藤总皂苷的提取分离为目标,从以下几个方面进行了研究。   (1)建立匙羹藤总皂苷的含量分光光度分析方法,采用5%香草醛-冰醋酸和高氯酸(1:4)混合液显色,最大吸收波长为560 nm,标准曲线为:y=4521.5x+0.1653,R=0.998,齐墩果酸含量在68~544μg具有较好的线性关系,回收率为95.80%~101.16%,平均回收率为97.90%,RSD=2.06%。   (2)采用传统溶剂法、超声提取法、微波提取法、解吸-内部沸腾两步法提取匙羹藤总皂苷,以匙羹藤总皂苷提取率为考察指标,应用单因素实验和正交实验方法,分别考察了不同因素对各种提取方法提取效果的影响,并优化了上述方法的提取工艺条件,结果如下:   采用传统溶剂法提取匙羹藤总皂苷,考察了提取溶剂、提取时间、提取固液比等因素对匙羹藤总皂苷提取率的影响,得到最佳工艺条件为:乙醇浓度60%、提取时间3 h×2、温度55℃、固液比1:15,匙羹藤总皂苷提取率为89.62%;   采用超声辅助提取法提取匙羹藤总皂苷,考察了乙醇浓度、超声功率、固液比和提取时间等因素对匙羹藤总皂苷提取率的影响,得到最佳工艺条件为:乙醇浓度60%、功率350 W、固液比1:15、提取时间30 min,匙羹藤总皂苷提取率为93.87%。   采用微波辅助提取法提取匙羹藤总皂苷,考察了乙醇浓度、微波功率、固液比和提取时间等因素对匙羹藤总皂苷提取率的影响,得到最佳工艺条件为:乙醇浓度60%、微波功率250 W、固液比1:10、提取时间8 min,匙羹藤总皂苷提取率为97.93%。   采用解吸-内部沸腾两步法提取匙羹藤总皂苷,得到最佳工艺条件为:解吸10 min,用55℃60%的乙醇减压提取,匙羹藤总皂苷提取率为89.18%。   (3)采用大孔树脂对匙羹藤总皂苷进行了分离富集。考察了D101、S-8等九种树脂对匙羹藤总皂苷的吸附量及解吸率,筛选并确定了D101树脂为富集匙羹藤总皂苷的树脂,进一步探讨了D101树脂固定床分离富集匙羹藤总皂苷过程中样品匙羹藤总皂苷的浓度、pH值、流速及洗脱剂的浓度的影响。结果表明,经过D101树脂固定床分离富集后,匙羹藤总皂苷含量由粗浸膏的24.83%提高到51.34%,皂苷的回收率为84.11%,匙羹藤总皂苷得到有效的富集。
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