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第一部分异氟烷暴露对成年雌鼠卵巢功能影响目的:探究异氟烷暴露对成年雌鼠卵巢功能的影响。方法:取50日龄C57成年雌鼠100只,随机分配到Oppm,2500ppm、5000ppm、10000ppm以及20000ppm异氟烷暴露组,每组各20只。适应结束后每日上午10时,各组动物分别按分组情况暴露于含Oppm,2500ppm、5000ppm、10000ppm以及20000ppm异氟烷的气体环境中(1.5hrs/d),连续暴露15日。15日麻醉暴露完成后,确认各只动物动情期别。各组取10只非动情期雌鼠眼球取血,检测血清基础FSH、LH、E2及AMH水平,另取4只雌鼠CO2麻醉处死后做卵巢切片并计数卵泡。各组保留6只实验动物自暴露结束次日开始每日行阴道涂片,记录动情周期变化,连续记录15天(约3个动情周期)。结果:相比对照组(Oppm),10000ppm、20000ppm异氟烷连续15日暴露可引起成年雌鼠动情周期显著延长。其中20000ppm异氟烷暴露组,成年雌鼠动情期相比对照组显著延长。此外,5000ppm、10000ppm、20000ppm异氟烷暴露组雌鼠血清bFSH、bLH水平较对照组升高,同时AMH水平明显下降。卵泡计数结果提示在高浓度异氟烷暴露可致闭锁卵泡增加,发育卵泡减少,但各组间卵泡计数差异尚无统计学意义。结论:较高浓度异氟烷暴露可破坏成年雌鼠正常排卵周期,影响血清激素分泌,破坏卵巢中正常发育卵泡,对雌鼠卵巢功能存在负性影响。第二部分异氟烷暴露影响卵巢功能的机制探讨目的:探究异氟烷暴露对成年雌鼠卵巢功能负面影响的机制。方法:取60只C57成年雌鼠原代颗粒细胞均匀接种于20个6孔板中。随机分为异氟烷暴露组和对照组,各组各10个6孔板。异氟烷暴露组采用2%异氟烷混合21%O2以及5%CO2暴露条件干预,对照组同时暴露于不含麻醉气体的同样环境中。两组各取3个6孔板干预3小时(为避免细胞凋亡)后记录各组三磷酸腺苷(ATP)合成水平。各组余下6孔板按各自干预条件干预6小时,记录干预结束后各组颗粒细胞内活性氧(ROS)水平及bax/bcl2在转录水平、翻译水平表达情况。结果:异氟烷干预组颗粒细胞,相比空白对照组颗粒细胞细胞内ROS水平升高,凋亡相关分子bax/bcl2在转录水平、翻译水平上调,细胞ATP生成减少。结论:异氟烷暴露可能通过增加卵巢颗粒细胞细胞内氧化应激,激活bax、bcl2线粒体凋亡通路,干扰线粒体能量生成,进而促进颗粒细胞凋亡,最终影响雌鼠卵巢功能。