咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞的细胞增殖及脂肪代谢的影响

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目的:研究咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞的细胞增殖及脂肪代谢的影响。方法:MTT法检测咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞增殖的影响;3T3-L1细胞诱导分化8天后,对各组细胞进行油红O染色并测定细胞内TG含量;分析分化1、2、4、8天后细胞中PPARγ2、C/EBPα、FAS mRNA表达以及FAS蛋白表达;细胞分化12天后,添加各组合或同时添加去甲肾上腺素(NA)作用24小时,分析各组细胞内脂肪分解的情况,并测定HSL蛋白表达。结果:(1)咖啡碱和儿茶素组合能明显抑制3T3-L1细胞的增殖,且儿茶素浓度越高,抑制作用越明显。(2)咖啡碱和儿茶素组合能明显抑制3T3-L1细胞分化过程中胞内TG的沉积,且咖啡碱浓度越高,抑制效果越明显。(3)添加40μg/mL儿茶素、16μg/mL咖啡碱+10μg/mL儿茶素、16μg/mL咖啡碱+20μg/mL儿茶素、80μg/mL咖啡碱+40μg/mL儿茶素、160μg/mL咖啡碱+40μg/mL儿茶素的3T3-L1细胞,在分化4天后PPARγ2、C/EBPαmRNA和分化8天后FAS mRNA、FAS蛋白的表达水平明显降低。(4)咖啡碱和儿茶素组合明显提高NA诱导成熟脂肪细胞脂解的能力和HSL蛋白的表达水平,且与咖啡碱浓度呈剂量效应关系。结论:本研究表明咖啡碱和儿茶素组合能够抑制脂肪细胞增殖,并通过调控3T3-L1细胞分化过程中相关转录因子PPARγ2、C/EBPα mRNA的表达降低FASmRNA的表达继而降低FAS蛋白的表达水平最后导致细胞内TG的沉积减少;咖啡碱和儿茶素组合与NA共同添加,能够提高HSL蛋白的表达量进而降低脂肪细胞内脂质的沉积;提示咖啡碱和儿茶素组合具有潜在预防肥胖的功能。
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