广东犬猫贾第虫分子流行病学调查及T_m-shift分型方法的建立

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yejunlan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蓝氏贾第虫是一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫,常寄生于人和犬猫等多种哺乳动物的十二指肠,可引起以腹泻为主的贾第虫病。本研究以流浪犬猫贾第虫为研究对象,选取tpi与bg基因作为遗传标记,通过PCR扩增对其分离株进行基因型鉴定,对广东省不同地区、不同年龄和不同性别流浪犬猫的贾第虫感染情况以及优势基因型进行调查。同时,以bg基因作为靶基因,建立广东猫源贾第虫常见基因型的Tm-shift分型方法,为猫源贾第虫的分子检测与流行病学调查提供新的技术手段。1.犬的贾第虫分子流行病学调查。对广东省四个地区(汕头、佛山、韶关和深圳)527份犬的粪样进行镜检,并以tpi和bg基因作为遗传标记,对其分离株进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,犬的贾第虫总感染率为10.8%(57/527),扩增的tpi和bg基因片段分别为334 bp和511 bp;系统进化树显示,25株犬源贾第虫被tpi基因成功分型,其中24株为AI型,1株为D型;57株犬源贾第虫被bg基因分型,其中26株为AI型,18株为C型,13株为D型。在不同年龄组中,低龄犬感染的贾第虫优势基因型为AI型,成年犬为C型,仅在低龄犬中发现混合感染情况。在不同性别组中,公犬感染的贾第虫优势基因型为C型,母犬为AI型,公母犬均有混合感染情况。在不同地区组中,汕头、深圳、韶关地区犬感染的贾第虫为AI、C和D型,佛山地区为AI和D型;除了韶关外,其他地区均有贾第虫混合感染情况。2.猫的贾第虫分子流行病学调查。对广东省三个地区(汕头、韶关和中山)104份猫的粪样进行镜检,并以tpi和bg基因作为遗传标记,对其分离株进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,猫的贾第虫总感染率为5.8%(6/104),扩增的tpi和bg基因片段分别为334 bp和511 bp;系统进化树显示,6株猫源贾第虫被tpi基因成功分型,其中6株为AI型;6株猫源贾第虫被bg基因分型,其中3株为AI型,3株为F型。在不同年龄组中,低龄组与成年组均发现贾第虫混合感染情况。在不同性别组中,公母猫均发现贾第虫混合感染情况。在不同地区组中,除韶关外,汕头和中山均有混合感染情况。3.猫源贾第虫Tm-shift分型方法的建立。选取bg基因作为靶基因,基于该基因的两个SNP位点(BG434和BG170)设计特异性引物,并在两条引物5’端加入不同长度的GC序列,根据PCR扩增后熔解曲线Tm值的差异进行基因分型,并进行了重复性、敏感性、准确性试验和临床检测。结果显示,基于2个SNP位点设计的两组引物均能对猫源贾第虫A型与F型进行准确分型;两组引物A型与F型Tm值的变异系数(CV)分别为0.14%与0.07%和0.10%与0.11%;当A型和F型样品稀释至1:106(即4.52×10-5 ng/μL和4.88×10-5ng/μL)时,Tm-shift方法仍可检出基因型;针对10个已知基因型的猫源贾第虫DNA样品,Tm-shift分型结果完全一致;对临床样品的检出率明显高于镜检,准确率与测序结果一致。结果表明,广东地区流浪犬猫的贾第虫存在人畜共患的风险,需要引起重视并采取必要的防控措施,以保障人类健康。建立的Tm-shift分型方法快速、特异,可为猫源贾第虫的分子检测与流行病学调查提供新的技术手段。
其他文献
以乙酸钠为单一碳源,在C/N比为3、温度为12—14℃的低C/N比、低温条件下通过间歇试验研究p H对反硝化亚硝酸盐积累规律影响.试验结果发现,在C/N为3时,p H值在7—9的范围内都
微信的广泛使用和信息传播为广告设计与传播提供了前所未有的大好局面,广告设计者在微信时代的大背景下,发挥优势,抓住机遇,利用平面广告设计的特点,加入一些细"微"改革,使得
蓝氏贾第虫(Giardia duodenalis)是哺乳动物中常见的胃肠道寄生原虫,感染宿主后常导致消化不良、腹泻、腹痛、生长缓慢等,从而对畜牧业造成损失及危害人类健康。尽管已经有许
心理科学研究依赖于对生理、心理数据的分析,情感是心理研究的重要内容.近年来随着认知神经科学研究技术的成熟,研究者利用脑电(electroencephalogram,EEG)等可以反映脑功能
油田的大站大库中聚集了大量的油气资源,这为油气资源的储存带来一定的难度,一旦储存不当就会产生严重的安全事故。针对此类现象,我们有必要针对油田大站大库的消防安全管理
近年来,河北省各级党委、政府按照中央和省委有关加快推进土地承包经营权流转的部署与要求,不断出台政策引导流转。随着农民市场经济意识的不断增强,河北省大部分农民已经具
蜜蜂品种间或品系问的杂交,子代都可能表现一定的杂种优势,亲本不同,所表现的优势一般也不相同。那么。蜜蜂的品种和品系是怎样界定的呢?在动物分类学上,蜜蜂属于昆虫纲、膜翅目、
本文应用智能化、信息化能力评估模型对中国海油炼化企业信息化应用的现状进行了分析,结合信息化新技术的发展以及海油炼化产业发展面临的挑战与机遇,提出了中国海油炼化产业
目的比较三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)启动子区-565C/T不同基因型的心肌梗死患者巨噬细胞胆固醇外流功能及ABCA1蛋白表达。方法应用人外周血单核细胞原代细胞培养及乙酰
近些年来,随着经济社会的发展,在企业运营管理中,价值链管理模式逐渐应运而生,价值链管理与财务管理是有着必要的联系。也就是价值链通过财务管理所表达的数据进行改变,而相