延平区两猪场伪狂犬血清检测及垂直感染风险评估

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目的:利用gE-ELISA和gB-ELISA试剂盒评估分析福建省南平市延平区两个规模化猪场的猪伪狂犬野毒感染率,并建立PCR诊断方法对两猪场猪伪狂犬野毒的垂直传播风险进行分析。方法:对2014年11月~12月份南平市延平区两个规模化猪场进行猪伪狂犬gE抗体及gB抗体检测,并对结果进行统计分析,评估两个规模化猪场的野毒感染阳性率。将统计结果与2013年南平市延平区流行病疫情调查结果进行对比分析,以评估2014年这两个猪场猪伪狂犬病毒(PRV)的流行进展。基于gE基因建立检测猪伪狂犬(PR)野毒的PCR诊断方法,并分析建立的PCR方法的特异性、灵敏性、重复性以及与国家标准的相符性。使用本试验建立的PCR方法检测两规模化猪场和延平区12个猪场的gE抗体阳性猪群的脐带血以及公猪精液,统计对比两猪场脐带血和精液的PCR阳性检出率与12个猪场的平均阳性率,评估两规模化猪场的垂直传播风险压力。结果与分析:A猪场共抽样353份血清,B猪场共抽样267份血清,gE抗体检测结果表明,A、B两场所检测的猪群中除公猪外,其他所有猪群均检出gE抗体,总阳性率分别为:51.08%、58.80%,说明了两场均是PR野毒的阳性场。两场公猪的gE抗体阳性率为0.00%,属于阴性猪群,说明了公猪群未被PR野毒感染。A、B猪场的母猪gE抗体阳性率分别为:53.87%、46.15%;30~40日龄保育猪的gE抗体阳性率分别为:26.09%、51.16%,加上可疑数的比例后分别为:31.89%、51.16%;60日龄保育猪的gE抗体阳性率分别为:45.45%、65.96%;而90~120日龄猪群gE抗体阳性率高达90%以上,由此推断在转舍(保育舍转至肥育舍)时该阶段猪群被PR野毒感染。gB抗体检测结果表明:两场的gB总抗体阳性率分别为96.87%、96.84%;两个猪场公猪的gB抗体阳性率都为100.00%;母猪的gB抗体阳性率分别为93.4%、100.00%,抗体水平高且离散度低,有可能是疫苗免疫和PR野毒感染的综合作用;30-40日龄保育猪的gB抗体阳性率分别为94.20%、97.67%,且整齐度高,因此可推断除了受母源抗体的影响,两猪场的首免效果好,而抗体水平A猪场高于B猪场;两猪场60日龄至120日龄仔猪血清的gB抗体S/N值持续降低,即抗体水平升高,而此阶段母源抗体已几乎消退,gE抗体也不降反升,因此推断60日龄尤其是120日龄转舍时猪群受野毒感染。2014年A场gE抗体阳性率平均值为51.08%,B场gE抗体阳性率平均值为58.80%,与2013年延平区20个猪场的猪伪狂犬病野毒感染调查结果56.26%相比,无下降,而从临床上调查A、B两场无爆发病情,说明两猪场猪群呈隐性感染,虽然2014年A、B两场PR的得到了有效的控制,但隐形感染和种猪排毒现象较为严重,需制定有效的免疫程序,加强疫苗免疫,提高猪场的养殖条件。在本研究中,我们基于gE基因片段,建立的猪伪狂犬病PCR诊断方法具有良好的特异性,灵敏性和重复性。对野毒、疫苗毒以及阴性病料的检测结果,与国标一致。利用这一方法,我们抽检了延平区12个猪场和A、B两场的脐带血和公猪精液。检测结果如下:延平区12个猪场共抽检132份脐带血,PCR阳性率为31.82%,A场阳性率为57.14%,B场阳性率为60.71%;12个场共抽检公猪精液86份,阳性率为15.12%,A、B两场公猪精液PCR野毒阳性率均为0.00%,由此推断A、B两猪场由母猪传播给仔猪的垂直感染压力大,高于延平区12个猪场的平均水平,而由公猪精液传播的暂未造成危险。由两猪场的gE以及gB抗体检测结果分析表明,两个猪场猪群除公猪外都呈隐性感染,临床无症状,可见猪群得到有效控制,生产较为稳定,但由保育猪舍转至肥育猪舍时,gE抗体明显升高,此阶段仔猪母源抗体已消退,加上环境突变等因素,猪群由于应激而容易被野毒感染,加上母猪排毒,使得病毒在场内循环,因此对仔猪首免及肥育猪监测是稳定gE抗体阳性的关键。结论:虽然通过疫苗接种有效减少猪伪狂犬病的发生的散播,但大部分猪场并没有彻底消灭猪伪狂犬病,部分免疫猪仍有排毒的可能,严重威胁易感猪。因此两猪场需要对母猪进行严格的免疫防控,尽可能淘汰阳性猪以免给猪场造成生产繁殖压力,保障新生仔猪的品质。用ELISA检测方法对猪场的不同猪群的PRV-gB抗体和PRV-gE抗体进行血清学检测,并对其结果进行评估,以作为判断该猪场是否感染野毒、接种疫苗是否达到最佳效果的依据,并结合PCR诊断方法分析评估被检猪群的垂直传播风险,对指导规模化猪场全面实施伪狂犬病净化是有实际意义的。
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