TGF-β诱导晶状体上皮细胞基质金属蛋白酶表达的实验研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:harric1234
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:(1)明确TGF—β1对晶状体上皮细胞增殖的影响。(2)明确体外培养晶状体上皮细胞是否存在基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)表达。(3)研究TGF—β1对晶状体上皮细胞MMPs表达的影响。 方法:(1)原代培养牛晶状体上皮细胞并传代,酶谱法检测原代、1代、2代、3代细胞培养液中MMPs活性。(2)原代细胞长满融合后,传入96孔板(10~4/孔),分别使用含不同浓度TGF—β1(终浓度为0.1、1、10ng/ml)的5%小牛血清培养液培养,对照组用加入等体积蒸馏水的的5%小牛血清培养液培养。24小时后收集细胞培养液,酶谱法检测MMPs活性。细胞用血细胞计数板法进行细胞计数。(3)1代牛晶状体上皮细胞用含10ng/ml TGF-β1的5%小牛血清培养液培养,12、24、36、48、72小时后分别收集培养液,酶谱法检测MMPs活性。细胞用血细胞计数板法进行细胞计数。对照组为加入等体积蒸馏水的5%小牛血清培养液培养的牛晶状体上皮细胞。 结果:(1)细胞计数结果:0.1、1、10ng/ml的TGF-β1作用24小时后细胞数分别为:1.65±0.12、1.4±0.15、1.34±0.22、1.3±0.17×10~4个/孔。对照组为:1.65±0.12×10~4个/孔。10ng/ml的TGF-β1作用12、24、36、48、72小时后细胞计数:1.04±0.10、1.29±0.17、1.30±0.15、1.47±0.22、1.56±0.26×10~4个/孔,对照组12、24、36、48、72小时细胞计数:1.32±0.13、1.65±0.12、1.75±0.16、1.85±0.16、2.36±0.16×10~4个/孔;(2)体外培养的原代、1代、2代、3代细胞培养液中均未检测到MMPs活性。(3)加入TGF-β1后细胞培养液中均检测到MMPs活性,分别为MMP-2(明胶酶A)和MMP-9(明胶酶B)。浓度为0.1、1、10ng/ml的TGF-β1作用24小时后,每10~4个细胞分泌的MMP-2活性分别为:699.79±60.77、870.20±46.45、989.50±98.44,MMP-9活性为:171.28±17.33、233.91±25.49、279.6±15.52。对照组未检测到MMP-2及MMP-9活性。(4)加入TGF-β1(终浓度10ng/ml)12、24、36、48、72小时后,两种明胶酶活性随时问呈上升趋势。MMP-2不同时间点的活性为:730±31.37,990±110.0,1102.2±46.42,1272.8±25.08,1639.2±39.69;MMP-9不同时间点的活性为:227.2±21.65,279.6±15.52,346.6±36.07,510.8±62.83,679.4±108。对照组未检测到MMP-2及MMP-9活性。 结论:(1)TGF-β1抑制牛晶状体上皮细胞的增殖。(2)正常牛晶状体上皮细胞不表竖南大学硕卜学位沦文l巧F一p诱分品状体}一皮细胞基质金属蛋白酶表达的实验研究达M人」ps活性。(3)TGF一pl能够诱导牛晶状体上皮细胞表达明胶酶活性,且明胶酶活性呈时间一浓度依赖性。
其他文献
日前,《北京住房和城乡建设发展白皮书(2020)》(以下简称《白皮书(2020)》)正式对外发布.《白皮书2020》是北京市住房和城乡建设发展研究中心受北京市住房和城乡建设委员会委
期刊
目的:  1.研究脓毒症休克患者的住院费用并分析其构成情况;  2.分析可能影响脓毒症休克患者住院费用的因素,并找出其主要影响因素;  3.根据研究结果结合实际提出有效控
目的探索全反式视黄酸(All-trans retinoic acid,at-RA)对大鼠骨髓间充质干细胞(Rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成骨分化的影响及其可能的分子机制。材料与方法体
第一部分32例肝细胞癌合并阻塞性黄疸的ERCP表现;目的:该文总结了32例经病理证实为肝细胞癌患者,出现梗阻性黄疸的ERCP表现,以探讨ERCP合并梗阻性黄疸者的病因和ERCP表现特征
有人说,妈妈的爱是严厉的,容不得孩子有半点差错;有人说,妈妈的爱是松懈的,对孩子犯错睁一只眼闭一只眼;还有人说,妈妈的爱是啰嗦的,从早上管到晚上。而在我心里,妈妈的爱却是慈祥而又严格的。  记得有一次,我刚写完要参加比赛的作文,转身我就随手把它放在桌子上,心里偷想著:一张纸放在桌子上该不会“凭空消失”吧?带着侥幸的心理,我就火烧屁股的跑了出去,可当我回来时,桌子上的作文却不见了踪影!真是怕什么来什
期刊
近日,中建二局华东公司合肥滨湖会展中心项目联合联通公司设立安徽首个5G+智慧工地体验馆,并在施工中率先投用5G装备强化现场管理.各类应用5G技术的智能硬件和业务管理系统,
期刊
近日,中铁四局管理研究院首个机制砂智能建造工厂项目在安徽霍山正式开工.项目开工仪式在霍山县下符桥镇灯盏窝机制砂厂项目现场举行.rn开工的项目为霍山国鑫建材年产550万吨
期刊