AQP1、AQP3在人不同退变椎间盘软骨终板和纤维环中表达的研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lisadandan
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[目的]研究AQP1、AQP3在人不同退变程度椎间盘软骨终板及纤维环中的表达情况,分析其与椎间盘退变程度的关系,为椎间盘退变的病理生理机制研究提供新的思路。[方法]1.收集特发性脊柱侧凸儿童椎间盘标本和椎间盘退变疾病患者椎间盘标本总共45例,根据Pfirrmann分级方法对椎间盘退变等级进行评估并分组,对椎间盘进行HE染色、运用实时荧光定量PCR方法检测Ⅱ型胶原mRNA表达情况,进一步验证椎间盘退变的程度。2.运用免疫组织化学技术分析AQP1、AQP3在椎间盘软骨终板和纤维环中的表达,分别计算其阳性细胞率。3.运用实时荧光定量PCR方法测定软骨终板和纤维环中AQP1、AQP3mRNA的表达情况。4.运用SPSS17.0软件对所获得的数据进行统计学分析。[结果]1.H.E染色结果:(1)正常对照组椎间盘软骨终板基质均质红染,软骨细胞数目多,软骨陷窝较多。纤维环走行清楚,软骨终板细胞数较纤维环细胞数多。(2)退变椎间盘软骨终板软骨细胞数量减少,软骨陷窝减少,软骨细胞邹缩,部分细胞间质淡染,基质纤维化。纤维环扭曲、结构紊乱,纤维环细胞数量减少。2.免疫组织化学技术分析:AQP1、AQP3在正常对照椎间盘和退变椎间盘的软骨终板和纤维环中均有表达,AQP1主要表达于细胞质中,AQP3除细胞质中表达外,细胞膜亦可见弱表达,胞核中均未见表达。随着椎间盘退变程度加重软骨终板和纤维环中AQP1、AQP3阳性细胞率均逐渐减少。但Ⅰ、Ⅱ级组组间AQP1及AQP3阳性细胞率差异无统计学意义,Ⅳ、V级组AQP1及AQP3阳性细胞率与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组相比降低明显,差异有统计学意义(P<0.05)。3.实时荧光定量PCR测定:在人椎间盘软骨终板和纤维环中均有Ⅱ型胶原、AQP1、AQP3、的表达。软骨终板和纤维环中Ⅱ型胶原mRNA相对表达量随着椎间盘退变程度加重逐渐降低。但软骨终板中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组间无显著差异,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组与Ⅳ、Ⅴ级组相比差异有统计学意义(P<0.05),Ⅳ级组与V级组也有显著差异(P<0.05)。纤维环中Ⅰ、Ⅱ级组与Ⅲ、Ⅳ级组有显著差异(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组与V级组相比差异有统计学意义(P<0.05)。在软骨终板和纤维环中AQP1、AQP3mRNA相对表达量随着椎间盘退变程度的加重逐渐降低,但Ⅰ、Ⅱ级AQP1、AQP3mRNA相对表达量的差异无统计学意义。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组与V级组AQP1、AQP3mRNA相对表达量的差异有统计学意义(P<0.05)。软骨终板Ⅱ级组与Ⅲ级组间、Ⅲ级组与V级组间AQP3mRNA相对表达量有显著差异(P<0.05)。[结论]1.人正常和退变椎间盘软骨终板及纤维环中均有AQP1、AQP3的表达。2.退变椎间盘较正常对照组椎间盘软骨终板和纤维环中AQP1、AQP3的表达量降低。3.椎间盘退变程度越重AQP1、AQP3表达量降低越显著。
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