白芍、赤芍作为植物药材,均为毛莨科干燥根。白芍主产于安徽、浙江等地;赤芍主产于内蒙古,辽宁等地。二者作为常用药材,在药理方面既有相同点,也有不同点。在制剂中,传统药材饮片以重量为单位入药,但由于药材由于产地、批次、生产工艺等不同导致其有效成分含量也随之不同,药效差异较为显著。随着配方颗粒等新剂型的问世及广泛应用,使成剂质量把控成为现今关注的焦点。本论文对白芍、赤芍配方颗粒制备工艺和标准汤剂及配方颗粒的质量标准进行了研究,为标准汤剂、配方颗粒的多组分质量控制提供了一定的依据。本课题具体研究内容及:1.白芍、赤芍标准汤剂质量标准研究建立了高效液相色谱法测定白芍、赤芍标准汤剂主要成分的方法确定最佳色谱条件为:乙腈-甲酸水溶液(0.1%)梯度洗脱,柱温为25℃,流动相流速为0.4ml/min,检测波长为230nm;利用UPLC-Orbitrap液质联用技术鉴别出白芍主要化学成分:没食子酰葡萄糖、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷四种化合物;通过标准汤剂方法学结果表明,该方法分离度高、专属性强、精密度高、稳定性好。利用该方法确定了白芍特征图谱中9个分离度和稳定性良好的特征峰、赤芍特征图谱中7个分离度和稳定性良好的特征峰,建立了白芍、赤芍标准汤剂的特征图谱。基于白芍9个、赤芍7个特征峰分别比较15批白芍、赤芍特征图谱的相似度,通过峰面积,相对峰面积,保留时间,相对保留时间等数据探讨不同来源不同产地的白芍、赤芍汤剂的异同。为后续白芍、赤芍配方颗粒多组分质量控质、含量指标确定,含量限度等的确定提供了依据。2.白芍、赤芍配方颗粒制备工艺及其质量标准研究对白芍、赤芍配方颗粒制备工艺进行了研究,将白芍、赤芍药材按照汤剂提取方法,浓缩蒸干至干浸膏。研磨粉碎后,通过对颗粒软材软硬度进行评价,将糊精作为首选辅料,物料比为白芍1:1.4,赤芍1:1.2。制成颗粒剂型后,以药典为标准,确定颗粒剂符合质量要求。建立了白芍、赤芍颗粒剂主要成分含量高效液相色谱测定方法,并进行方法学考察(包括专属性、线性、精密度、重现性、加样回收率、稳定性),结果表明本,该方法可靠、准确、专属性强、重现性好。利用该方法测定十五批白芍、赤芍标准汤剂及配方颗粒的各指标成分含量,并计算各成分的转移率。白芍汤剂-颗粒的传递率芍药内酯苷传递率分布于30-100%;芍药苷传递率于68-98%;苯甲酰芍药苷传递率分布于27-67%。在白芍汤剂-颗粒过程中能够稳定传递的对照品为芍药苷。赤芍汤剂-颗粒的儿茶素传递率分布于78%-99%;芍药内酯苷传递率分布于78-99%;芍药苷传递率于89-99%;苯甲酰芍药苷传递率分布于70-102%。由此可得出结论,在赤芍汤剂-颗粒中能够稳定传递的成分为儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷。在上述研究基础上,制订了白芍、赤芍配方颗粒质量标准(草案)。3.白芍提取物降糖作用机制的初步研究四氧嘧啶有选择性地破坏小鼠胰岛β细胞,减少胰岛素分泌进入血液循环,进而导致小鼠血糖升高,在动物实验中常用来糖尿病小鼠造模。高浓度胰岛素诱导HepG2细胞多用来成胰岛素抵抗模型。这两种模型常用来探究药物对糖尿病的作用机制,其结果稳定良好,置信区间大。四氧嘧啶造模成功的糖尿病小鼠较高概率的出现多饮、多食、多尿、消瘦、血糖值高于15mmol/L等糖尿病明显体征和症状。灌胃给药30d白芍提取物后,高中低剂量组上述糖尿病体征明显好转。糖尿病实验指标经测量后,各治疗组均具有较好的降血糖效果。白芍高剂量组在下调空腹血糖、提升糖耐量、增加肌糖原含量、促进胰岛素分泌等方面作用较为显著,白芍中、低剂量组在下调空腹血糖、提升糖耐量方面有较为明显的作用,但对于提升血清胰岛素含量,肝肌糖原含量效果不显著。胰岛素抵抗实验中,白芍提取物及芍药苷皆可促进肝细胞对外周葡萄糖的吸收,改善胰岛素抵抗。芍药苷组及白芍提取物组对胰岛素改善作用相似,而白芍提取物中芍药苷含量约占2.5%,及白芍提取物中芍药苷含量小于0.1mg/ml,说明白芍提取物中除芍药苷发挥改善胰岛素抵抗作用外,仍有其他物质可辅助发挥改善胰岛素抵抗作用。综上所述,本文对白芍、赤芍配方颗粒的制备工艺和药材-汤剂-配方颗粒的质量传递过程进行系统的研究,制订了白芍、赤芍配方颗粒的质量标准(草案),为实现中药配方颗粒在临床应用中的标准化、现代化、国际化奠定基础。在此基础上,开展了白芍提取物对糖尿病小鼠降糖作用机制的初步研究,为白芍的临床降糖作用提供药理学资料。