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背景食管癌是威胁人类健康的常见恶性肿瘤,在全球范围内,其发病率和死亡率分别位居恶性肿瘤的第8位和第6位。食管癌的组织类型及发病情况存在明显地区差异:欧美国家以腺癌为主;而在亚洲国家,鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)占全部病例的90%以上。ESCC患者预后较差,总的5年生存率不到30%,其中易发生远处转移是导致患者死亡的重要原因。传统的影像学及肿瘤标志物检查,难以及时发现肿瘤的转移或复发。在肿瘤复发或转移的过程中,循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)起到了重要的作用,CTC由于某种原因脱离肿瘤原发灶,进入循环系统到达新组织,并在一定条件下发展为转移灶。目前常用的CTC检测方法主要包括:依赖肿瘤相关标记物检测的CellSearch系统以及基于形态学富集CTC的膜过滤分离肿瘤细胞技术(isolation by size of epithelial tumor cells,ISET)。随着CTC检测技术的进步,CTC检测的应用成为目前肿瘤学界的研究热点。近年来对乳腺癌,肺癌,结直肠癌等研究证实,CTC是肿瘤患者独立预后因子、靶向治疗的标志物和靶点,CTC检测对早期肿瘤风险评估、预后评估、疗效监测等方面具有重要意义。与其他恶性肿瘤相比,对ESCC患者外周血CTC检测及其临床意义的研究较少,在PubMed检索系统上仅有2篇使用CellSearch系统研究食管癌CTC的文献报道,而尚无使用ISET技术在该领域的研究报道。目的1.使用cellsearch系统及iset技术(ctc-biopsy系统)两种方法检测同一组escc患者外周血ctc的表达情况,比较两种技术方法的ctc检测结果。2.分析ctc检测结果与escc患者临床病理特征的关系,进而探讨ctc检测对escc诊断治疗的临床指导意义。方法2014年5月-2014年12月山东省肿瘤医院收治的61例病理确诊为escc的初治患者作为研究对象,同期选择22例健康志愿者作为对照组。受试者入组前均签署知情同意书,登记受试者临床资料。受试者在接受治疗前于肘正中静脉采集空腹血12.5ml,其中7.5ml血样用于cellsearch系统检测,5ml血样用于ctc-biopsy系统检测。ctc检测流程严格按照检测设备的操作手册执行。ctc结果判读采用双盲判读,再经第三方复核以保证检测结果的准确。采用spss17.0软件对实验数据进行统计分析。两样本均数比较采用t检验,率的比较采用χ2检验或fisher确切概率法。以p<0.05认为差异具有统计学意义。结果1.健康志愿者外周血ctc检测结果:分别使用cellsearch系统及iset技术检测22例健康志愿者外周血,均未检测到ctc。2.escc患者外周血ctc检测结果:1)cellsearch系统检测61例escc患者外周血,在1例iv期患者的外周血中检测到ctc,总的检出率为1.6%(1/61)。使用cellsearch系统检测未能检测到ctm;2)iset技术检测61例escc患者外周血,在20例患者的外周血中检测到ctc,总的检出率为32.8%(20/61);按病理分期i-iv期患者ctc检出率分别为0.0%(0/4)、30.8%(4/13)、31.4%(11/34)、50.0%(5/10)。在3例患者外周血中检测到ctm,总检出率为4.9%(3/61);按病理分期i-iv期患者ctm检出率分别为0.0%(0/4)、7.7%(1/13)、2.9%(1/34)、10.0%(1/10)。3.escc患者外周血ctc检测结果与患者临床病理特征的相关性:1)CellSearch系统检测CTC结果与ESCC患者年龄、性别、ECOG评分、饮酒史、吸烟史差异,血清CEA检测结果,治疗前血红蛋白水平、治疗前血小板计数、粒淋比均不相关,与病理分期、肿瘤位置、大小、分化程度、侵犯程度,有无脉管侵犯,有无淋巴结转移情况均不相关;2)ISET技术检测CTC结果与ESCC患者病理分期、治疗前血小板计数相关(P<0.05),与其他临床及病理特征均不相关。结论1.CellSearch系统检测ESCC患者外周血CTC,特异度为100%,但灵敏度低,仅为1.6%(1/61);ISET技术检测ESCC患者外周血CTC,特异度为100%,灵敏度为32.8%(20/61),使用ISET技术研究ESCC中CTC是可行的。2.造成CellSearch系统与ISET技术两种方法检测ESCC患者外周血CTC检出率差别较大的原因是其检测原理不同;其中CellSearch系统检测CTC检出率较低的原因还需要进一步研究。3.首次报道,使用ISET技术可以在ESCC患者外周血中检测到CTM。4.ISET技术检测CTC结果与ESCC患者病理分期、治疗前血小板计数相关,提示CTC检测结果可作为ESCC分期的有益补充,并提示ESCC血行转移与血小板增多关系密切。