论文部分内容阅读
目的:1.观察“阴三针”对雷公藤多苷片诱导的小鼠卵巢早衰模型的卵巢功能及下丘脑-垂体-卵巢(hypothalamic-pituitary-ovarian,HPO)轴的调控作用;2.探讨HPO轴在卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)发病中的作用机制及“阴三针”对POF模型小鼠HPO轴的调控作用,并揭示β-EP及HPO轴在POF发病和治疗中的作用,为电针改善POF提供理论依据。方法:将8周龄C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、模型组(雷公藤多苷片造模组)、电针组(“阴三针”治疗组)、药物组(坤泰胶囊治疗组)、假电针组,共5组,每组10只。以小鼠一般生理情况、阴道脱落细胞、脏器指数、血清相关性激素水平、卵巢组织形态、卵巢中TNF-α、Caspase-3蛋白表达为观测指标,观察“阴三针”对卵巢早衰的治疗和改善作用。结果:1.生理病理特征:造模前各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),造模后各组小鼠体重与空白对照组相比,差异皆有统计学意义(P<0.05)。与模型组小鼠对比,电针组治疗前后体重差值增长较明显(P<0.05)。2.动情周期:空白对照组动情周期为4~5天,模型组动情周期延长为7~9天,电针组动情周期为4~5天,药物组动情周期为4~6天,假电针组动情周期为6~8天。3.脏器指数:与空白对照组相比,模型组小鼠脏器指数(卵巢、子宫、脾脏)均下降(P<0.05)。与模型组相比,电针组和药物组的小鼠卵巢、子宫指数均增加(P<0.05)。4.各组小鼠血清中相关性激素和下丘脑中β-EP水平的比较:与空白对照组相比,模型组血清FSH、LH水平显著上升(P<0.05);电针组小鼠血清中LH水平较模型组下降(P<0.05)。造模后小鼠血清中E2水平和下丘脑β-EP水平较空白对照组明显下降(P<0.05),经不同干预措施后,电针组小鼠血清E2和下丘脑β-EP水平提高显著(P<0.05)。5.各组小鼠卵巢形态学改变及各级卵泡所占百分比:空白对照组小鼠卵巢各级卵泡发育正常。模型组小鼠卵巢明显萎缩,颗粒细胞排列紊乱。电针组小鼠卵泡较模型组相比,卵巢体积明显增大,空泡样卵泡减少或消失。与空白对照组相比,模型组、假电针组小鼠生长卵泡所占百分比小,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,电针组小鼠生长卵泡所占百分比明显增大(P<0.05)。模型组和假电针组的闭锁卵泡所占百分比较空白对照组大(P<0.05),电针组闭锁卵泡所占百分比明显减少(P<0.05)。模型组、药物组、假电针组黄体所占百分比与空白对照组相比明显较小(P<0.05),而电针组在治疗后黄体所占百分比增加(P<0.05)。6.Western blot法检测小鼠卵巢中TNF-α、Caspase-3蛋白的变化:模型组小鼠卵巢中TNF-α蛋白的表达显著高于空白对照组(P<0.05)。电针组、药物组和假电针组TNF-α蛋白的表达显著低于模型组(P<0.05)。各组小鼠卵巢中Caspase-3蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05),但模型组小鼠卵巢中Caspase-3蛋白的表达有明显高于空白对照组的趋势,电针组小鼠卵巢中Caspase-3蛋白的表达较模型组相比,有明显下降的趋势。结论:1.“阴三针”能够改善POF模型小鼠的一般生理病理情况,恢复动情周期,提高小鼠卵巢和子宫指数,调节性激素水平,改善卵巢组织形态、抑制TNF-α细胞因子,下调Caspase-3的表达。2.“阴三针”的治疗作用主要是通过HPO轴正负反馈调节起作用。3.本实验结果表明,“阴三针”通过调控HPO轴,延缓HPO轴功能衰老,促进体内环境相对平衡,从整体上改善卵巢早衰。