【摘 要】
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[目的]:探讨异种同源KDR mRNA修饰的树突状细胞诱发抗肝肿瘤血管免疫、打破肿瘤免疫耐受的效果。[方法]:用分子克隆技术构建pmRNA IRES-hKDR,pmRNA IRES-mKDR ,用脂质体转染
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[目的]:探讨异种同源KDR mRNA修饰的树突状细胞诱发抗肝肿瘤血管免疫、打破肿瘤免疫耐受的效果。[方法]:用分子克隆技术构建pmRNA IRES-hKDR,pmRNA IRES-mKDR ,用脂质体转染的方法建立表达KDR的肿瘤细胞模型;采用MEGAscript SP6高产量mRNA体外转录试剂盒生成mRNA;树突状细胞的制备和培养按Lutz’s方案稍加修改;用hKDR mRNA或mKDR mRNA致敏小鼠骨髓来源的DCs后免疫C57BL/6小鼠,7天后取鼠脾细胞行乳酸脱氢酶(LDH)释放法实验,检测特异性CTL杀伤活性;或给免疫小鼠皮下接Hepa1-6肝癌细胞,观察荷瘤小鼠成瘤情况。[结果]:hKDR mRNA/DCs免疫小鼠1周后其细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性明显强于mKDR mRNA/DCs:在E∶T为100∶1、50∶1、25∶1情况下,杀伤率hKDR mRNA/DCs组分别为71.6%、55.8%、22.7%, mKDR mRNA/DCs组分别为48.2%、30.2%、15.4%,空白DC对照分别为19.2%、12.3%、6.9%,相同比例下每两组之间有显著性统计学差异(P<0.05);hKDR mRNA/DCs免疫小鼠后1周接种1×106Hepa1-6肝癌细胞,2个月后仍有80%的小鼠无瘤生长;而mKDR mRNA/DCs免疫小鼠后1周接种1×106Hepa1-6肝癌细胞,2个月后只有20%未长瘤,对照组小鼠2周内全部长瘤。[结论]:异种同源KDR mRNA修饰的树突状细胞能有效的打破肿瘤的免疫耐受,诱发强烈的抗原特异性细胞免疫反应。
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