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目的：通过H-2半相合CD34+造血干细胞混合合理剂量的CD3+细胞进行移植治疗白血病小鼠，以求达到既控制严重移植物抗宿主病（GVHD）又保留移植物抗白血病效应（GVL）的作用，为临床应用提供理论依据。方法：1、8-9周龄、健康清洁级雌性C57BL/6（H-2b）小鼠与8-9周龄、健康清洁级雄性615（H-2K）小鼠按2：1长期同居法杂交，培育（C57BL/6×615）F1（H-2kb）小鼠。2、以8-9周龄、健康清洁级雄性C57BL/6（H-2b）小鼠为供者，8-9周龄、健康清洁级雌性（C57BL/6×615）F1（H-2Kb）小鼠为受者，建立H-2半相合的小鼠移植模型。3、腹腔接种L615白血病细胞，建立（C57BL/6×615）F1（H-2kb）小鼠L615白血病模型。4、利用免疫磁珠系统（MiniMACS）纯化C57BL/6供鼠骨髓CD34+造血干细胞及脾脏CD3+细胞，FACS评估纯化前后骨髓细胞悬液CD34+细胞及脾细胞是液CD3+细胞百分比，台盼蓝染色检测细胞活力。5、移植分组：A组单纯白血病组；B组单纯照射；C组单纯移植CD34+细胞1×10~5/只；D组CD34+细胞混合CD3+细胞1×10~7/只；E组CD34+细胞混合CD3+细胞5×10~7/只；F组CD34+细胞混合CD3+细胞1×10~8/只；G组CD34+细胞混合CD3+细胞1.5×10~8/只。6、观察不同移植方案对荷瘤小鼠的生存时间、GVHD发生情况及GVL效应的影响。7、对移植后生存时间＞60天的小鼠检查骨髓细胞性染色体，判断移植后骨髓造血重建细胞来源。结果：1、（C57BL/6×615）F1（H-2kb）小鼠接种L615白血病细胞后100％发病。2、纯化后CD34+细胞纯度平均为81.5％（范围76.80～85.3％），回收率为47.54％（范围40.50～54.31％）；纯化后CD3+细胞纯度平均为95.35％（范围89.82～10O％），回收率为61.17％（范围55.41～69.70％）；CD34+细胞及CD3+细胞的细胞活力在纯化前后无显著变化（P＞0.05）。3、单纯白血病未加任何处理组自然生存时间为7.70±1.01天；TBI对照组平均生存期为14.33±1.92天；单独移植CD34+细胞组平均生存期29.11±0.92天（与TBI对照组比较P＜0.01），100％死于白血病复发；CD34+细胞混合CD3+细胞1×10~7/只组平均生存期44.30±16.55天（与单独移植CD34+细胞相比P＜0.05），50％死于白血病复发，50％生存时间＞60天，无GVHD发生；CD34＋细胞混合 CD3＋细胞 5 X 10＼只组，100％生存时间历0天（实验观察60天），无GVHD发生，无白血病复发；CD34＋细胞混合CD3＋细胞 IX 10勺只组平均生存期为 48．88土9．82天币2．5％死于 GVHD，37．5％生存时间历0天，无白血病复发（与 CD34＋细胞混合 CD3＋细胞 5 X 10V只组比较P狈．of）；CD34＋细胞混合CD3＋细胞l．5 X 10‘／只组平均生存期为 23．75士4．74天（与 CD34＋细胞混合 CD3－细胞 IX 10个只组比较P＜0．01），1000死于GVHD，无白血病复发。4、对移植后生存时间＞60天的小鼠进行染色体检查，y染色体检出率为 100％。结论：l、L615白血病细胞株可以在（C57BL／6X615）FI（HE）小鼠接种成功，建立＊代小鼠L615白血病模型。2、应用MiniMACS纯化，可获得高纯度CD34＋细胞、CD3＋T淋巴细胞，而细胞活力不受影响。3、单独移植CD34＋细胞可以获得造血重建，但无GVL效应。4、CD3＋T淋巴细胞是发生GVHD和GVL效应的主要效应细胞，移植物中的CD3＋细胞数量与GVHD的发生率和GVL效应密切相关，通过限定移植物中的CD3＋淋巴细胞的含量能够保留GVL作用而有效控制GVHD发生。5、本实验移植模型移植物中 CD3＋细胞的合理剂量为 5 X 10’／只左右。