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本试验所用旱柳品系Q106是山东省东营市的地方优良新品种,与其它旱柳品种相比,具有一定的抗旱、耐盐、耐瘠薄、抗风沙能力,并且有速生、成材早等优点.在生态环境中起着很重要作用,同时也是良好的园林绿化材料.土壤盐渍化是影响农业生产和生态坏境的一个重要因素.它使大量的国土荒芜,生态环境更加恶劣.因此,盐碱地资源开发利用有着及其重要的社会意义.旱柳的最高耐盐性为4‰,超过此极值,其生长受到限制、甚至死亡.对此本实验在利用旱柳组培再生体系建立的基础上,进行了农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)导入旱柳的研究,目的是进一步提高旱柳的耐盐性和抗旱性,扩大其适宜的种植范围.主要研究结果如下:1.旱柳再生体系的建立:以带芽茎段进行无菌材料扩繁时MS+BA0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30 g/L和BA0.4 mg/L+NAA0.4 mg/L+蔗糖30 g/L;MS+BA0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30 g/L和BA0.4 mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖30 g/L交替使用为最佳;以茎段作为外植体在附加NAA0.25mg/L+BA1.0mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织效果最好,芽分化率可达88.3﹪;将出芽愈伤组织块接种到附加NAA0.15mg/L+KT3.0mg/L的MS分化培养基上效果最佳,平均分化芽数为15.4个;壮芽培养基为MS+BA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS附加GA30.2 mg/L+NAA0.5 mg/L,生根效果好.2.BADH基因转化体系的建立.400 mg/L的头孢酶素作为抗菌素抑制和去除农杆菌最佳,且对愈伤组织和组培苗生长影响不大;在Kan 10 mg/L时愈伤组织褐化死亡率97﹪,卡那霉素(Kan)15 mg/L时组培苗白化死亡率为100﹪;利用农杆菌介导,以愈伤组织作为外植体进行侵染,侵染时加入10 mg/L乙酰丁香酮,用1/2YEB和1/2MS液体培养基活化农杆菌;菌液浓度OD值0.3-0.5、预培养时间3d,共培养时间3d有利于提高转化率;转化小芽经GUS早期检测和卡那选择(90d),获得了8株转化植株,初步说明外源基因整合到植株基因组DNA中.研究结果初步建立了一个良好的林木农杆菌介导的基因转化方法.