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10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）是一种反式不饱和脂肪酸，是蜂王浆中主要活性成分之一，具有抗菌、免疫调节及抗肿瘤等多种重要的生理功能。10-HDA主要分泌于蜜蜂工蜂的上颚腺，但其生物合成的机理目前还不清楚。我们通过分析工蜂上颚腺10-HDA分泌规律，应用比较蛋白质组学的方法对不同日龄工蜂上颚腺的差异蛋白进行分离和鉴定，筛选生物合成10-HDA的相关蛋白,初步揭示10-HDA生物合成的分子机制，为利用分子生物学、基因工程等技术提高10-HDA产量提供理论依据。本文以山东长清蜂场意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica）工蜂为实验动物，通过高效液相色谱法（HPLC）分别检测0、5、10、15、20、25、30日龄工蜂头部10-HDA含量，研究随着日龄的增加10-HDA的分泌规律。从0日龄到30日龄，10-HDA分泌量逐渐增加，20到25日龄增加最快，0日龄最低，为0.53±0.33μg/只；25日龄最高，为69.72±5.46μg/只。冬季和夏季10-HDA分泌规律相一致，且冬季工蜂10-HDA分泌量比夏季对应日龄工蜂分泌量高。本文通过检测上颚腺和去除上颚腺的工蜂头部10-HDA含量，进一步证实10-HDA来源于工蜂上颚腺。根据工蜂上颚腺10-HDA的分泌规律，选择10-HDA分泌量差异显著的0日龄（最低）与25日龄（最高）工蜂，首先通过扫描电镜观察0日龄和25日龄工蜂上颚腺形态，发现0日龄的上颚腺呈液泡状，未成“V”形，易破，有光泽，而25日龄上颚腺明显呈“V”形，是无光泽的组织实体，乳白色或暗灰色，25日龄的腺体比0日龄大且饱满。通过双向电泳技术分离0日龄与25日龄上颚腺差异蛋白，并进行质谱鉴定。结果分离和鉴定出29个差异蛋白点，分子量大部分在20~70kD之间，主要是酸性蛋白，碳水化合物和能量代谢相关蛋白占44.83%，外源蛋白类占13.79%，蛋白折叠类占10.34%，转录与翻译类、细胞骨架类、抗氧化类和发育蛋白类均占6.90%，未知蛋白3.45%。