炎症效应导致慢性阻塞性肺疾病相关性肾损伤的实验研究

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目的:慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种与气道和肺对烟草烟雾等有害气体或有害颗粒的慢性炎症反应增强有关的疾病,包括气道炎症和肺外炎症效应,气道炎症可引起持续气流受限和肺功能损害并进行性发展,而肺外炎症效应可导致心血管疾病等风险显著增加,但这种炎症效应是否也会导致肾脏损伤呢?本课题以COPD大鼠模型为研究对象,探索COPD的炎症效应对肾脏的影响及相关机制,为临床早期检测并有效防治COPD相关性肾损伤提供理论依据。方法:SPF级健康雄性Wistar大鼠16只,体重(200±20)g,采用随机数字表法分为COPD模型组(C组)和健康大鼠对照组(N组),每组8只,用改良香烟烟熏加气管内滴脂多糖(LPS)法建立COPD大鼠模型。成功建立COPD模型后观察大鼠临床表现;采集两组大鼠晨尿测定尿微量白蛋白(m Alb)浓度;采血检测两组大鼠血清胱抑素C(Cys C)、C-反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;麻醉后处死大鼠取两组大鼠肺和肾脏组织用ELISA法检测肺、肾组织匀浆中CRP和TNF-α浓度;取大鼠肺和肾脏组织作HE染色光镜下观察肺和肾脏的病理改变,并计算平均内衬间隔(MLI)及肺泡破坏指数(DI),电镜下观察大鼠肾组织的超微结构。结果:1.大鼠一般情况:C组大鼠随着造模天数的增加逐渐出现毛发发黄、无光泽,食量减少,体重增幅减少,行动迟缓,活动减少,造模后期出现口唇及四肢发绀、呼吸深快及腹肌抽搐等呼吸困难的表现;N组大鼠毛发光泽度正常,反应灵敏,口唇及爪色淡红,体重逐渐增加,饮水进食情况良好,呼吸平稳,无明显行为异常。2.尿m Alb浓度(mg/L):C组大鼠尿m Alb(3.29±0.60)较N组(1.89±0.20)显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。3.血清Cys C浓度(mg/L):C组大鼠血清Cys C(0.07±0.163)较N组(0.03±0.005)显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。4.血清、肺及肾组织匀浆中TNF-α浓度(pg/m L):C组大鼠血清(251.28±13.83)较N组大鼠血清(202.76±7.24)、C组大鼠肺组织匀浆(244.84±15.10)较N组大鼠肺组织匀浆(216.96±10.45)、C组大鼠肾组织匀浆(254.9±26.49)较N组大鼠肾组织匀浆(206.17±16.78)中TNF-α浓度均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.01)。5.血清、肺及肾组织匀浆中CRP浓度(ng/m L):C组大鼠血清(7.78±0.21)较N组大鼠血清(7.269±0.15)、C组大鼠肺组织匀浆(8.13±0.33)较N组大鼠肺组织匀浆(7.29±0.16)、C组大鼠肾组织匀浆(8.03±0.30)较N组大鼠肾组织匀浆(7.19±0.49)中CRP浓度均有增高,差异均有统计学意义(P<0.01)。6.C组大鼠各项检测指标的相关性分析:C组大鼠尿m Alb与血清中TNF-α(r=0.949,P<0.01)和CRP(r=0.738,P<0.05)均呈正相关,与肺组织中TNF-α(r=0.946,P<0.01)和CRP(r=0.906,P<0.01)均呈正相关,与肾组织中TNF-α(r=0.902,P<0.01)和CRP(r=0.933,P<0.01)均呈正相关。血清Cys C浓度与血清中TNF-α(r=0.944,P<0.01)和CRP(r=0.832,P<0.05)均呈正相关,与肺组织中TNF-α(r=0.918,P<0.01)和CRP(r=0.979,P<0.01)均呈正相关,与肾组织中TNF-α(r=0.981,P<0.01)和CRP(r=0.936,P<0.01)均呈正相关。C组大鼠肺与肾组织匀浆中TNF-α呈正相关(r=0.879,P<0.01),肺与肾组织匀浆中CRP呈正相关(r=0.859,P<0.01)。7.光镜下肺组织病理改变:与N组大鼠相比较,C组大鼠可见支气管管腔狭窄,管壁平滑肌增生,部分上皮细胞变性坏死,杯状细胞增多,肺组织内大量炎症细胞浸润,肺泡壁破坏,肺泡腔扩大,部分破裂融合形成肺大泡,肺泡间隔明显增厚,C组MLI(88.5±23.10)μm较N组大鼠MLI(48.4±6.87)μm显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),C组DI(59.9±9.87)%较N组大鼠(22.1±5.94)%显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。8.光镜下肾组织病理改变:与N组比较,C组大鼠肾组织光镜下可见部分肾小球充血、部分肾小管上皮细胞肿胀。9.电镜下肾组织超微结构改变:与N组大鼠比较,C组大鼠肾组织电镜下可见肾小球足突有融合,内质网扩张,线粒体肿胀,肾小管上皮细胞局灶性变性。结论:1.改良烟熏加气管内滴入LPS可以成功复制大鼠COPD模型;2.在COPD疾病进程中,可以引起一定程度的肾脏形态和功能的损伤;3.COPD相关性肾损伤与肺外炎症效应密切相关,这种炎症效应可能是COPD相关性肾损伤的机制之一。
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