【摘 要】
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精子发生是一个多阶段,多步骤的持续分化过程,受到位于性染色体和常染色体上的一系列基因的调控。精子发生过程相关基因的研究对深入了解精子发生的分子机理和阐明男性原发不
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精子发生是一个多阶段,多步骤的持续分化过程,受到位于性染色体和常染色体上的一系列基因的调控。精子发生过程相关基因的研究对深入了解精子发生的分子机理和阐明男性原发不育的遗传病因具有重要的理论和临床意义。 四川大学华西医院医学遗传研究室采用消减杂交、mRNA差异显示、RACE等方法先后克隆了多个与生精过程相关的基因,如:TCP11、ZNF230、ZNF313、ZNF463等基因,其中多个为编码锌指蛋白的基因。人ZNF313基因定位于20q13,编码的228个氨基酸的锌指蛋白,同时含有C2H2和C3HC4锌指结构域。由于不同的加尾信号产生两个不同长度的转录本,其中750bp的转录本在睾丸组织中高表达,同时也在多种组织中有表达。提示该基因有可能参与了睾丸组织的发育过程,调控了精子的发生。 本文选择了人ZNF313基因为对象,分别用含有U6和H1启动子的两种shRNA表达载体构建了针对人ZNF313基因的五个shRNA重组表达载体。瞬时转染人正常肝HL-7702细胞株后,RT-PCR和蛋白印迹检测结
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