紫花杜鹃抗炎活性成分研究

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紫花杜鹃(Rhododendron mariae Hance)又名岭南杜鹃,杜鹃花科杜鹃花属植物,广泛分布于江西、湖南、广东、广西等地。现有文献记载,紫花杜鹃的叶和嫩枝含挥发油、多种萜类成分、酚类、有机酸和鞣质。也有报道称紫花杜鹃叶含有香豆素、莨菪亭和齐墩果酸。紫花杜鹃的主要活性成分有槲皮素、槲皮苷、金丝桃苷、杜鹃素等多种黄酮类化合物,具有止咳、祛痰、抗炎、抗菌、平滑肌解痉、呼吸抑制作用和中枢抑制等多种作用,尤其对哮喘、痰多及支气管炎有显著疗效。由于目前国内外关于紫花杜鹃的文献较少,其和黄杜鹃(羊踯躅)、凝毛杜鹃等带毒性的同科同属植物广泛生长分布于江西、湖南、广东、广西等地带,其会否含有同属有毒植物羊踯躅中的木藜芦毒烷型二萜类毒性物质尚不能明确。现有文献多数认为紫花杜鹃的抗炎、祛痰、镇咳活性来源于已被分离确认的黄酮类物质,为论证此观点的正确性,也为寻找紫花杜鹃中是否还有其他结构新颖的化合物,能为广州白云山和记黄埔中药有限公司(广药集团旗下子公司)保有的紫花杜鹃片、紫茶颗粒两个药品批文的二次开发提供科学依据,本论文对紫花杜鹃的化学成分及药理作用开展了进一步的研究。本论文对紫花杜鹃70%醇提总浸膏进行了化学成分研究,并通过斑马鱼CuSO4诱导炎症模型和断尾急性炎症模型对总浸膏、大孔树脂子馏分和分离得到的单体化合物分别进行抗炎活性的初步研究。一、紫花杜鹃的化学成分研究本论文通过各种现代色谱分离手段和光谱鉴定方法,从紫花杜鹃(Rhododendron mariae Hance)的70%乙醇提取物中分离得到11个化合物,包括3个穿心莲内酯二萜类化合物、7个三萜类化合物和1个黄酮类化合物。它们分别为:3-脱氢脱氧穿心莲内酯(DJ-1)、去氧穿心莲内酯(DJ-2)、脱水穿心莲内酯(DJ-3)、2α,3α,24α-三羟基乌苏酸(DJ-4)、2α,3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(DJ-5)、2α,3β-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(DJ-6)、2α,3β,24β-三羟基齐墩果酸(DJ-7)、2α,3β,24α-三羟基乌苏酸(DJ-8)、海藻酸A(DJ-9)、2α,3β,24β-三羟基乌苏酸(DJ-10)、杜鹃素(DJ-11)。化合物DJ-1、DJ-2和DJ-3是穿心莲内酯二萜类化合物,为首次从杜鹃花科中分离得到。DJ-4—DJ-10为三萜类化合物,其中,DJ-4、DJ-7、DJ-9和DJ-10为首次从杜鹃花属中分离得到,DJ-5、DJ-6和DJ-8为首次从紫花杜鹃中分离得到。二、紫花杜鹃抗炎活性的初步研究建立斑马鱼CuSO4诱导炎症模型和断尾模型,对紫花杜鹃醇提总浸膏、大孔树脂子馏分和分离出的单体化合物进行抗炎效果初步研究。结果显示,总浸膏(浓度:100μg/ml)可以使硫酸铜诱导的斑马鱼炎症模型的巨噬细胞数量和斑马鱼断尾处聚集的巨噬细胞数量显著减少,与子馏分、单体化合物相比其抗炎活性最强,比阳性药DEX组(浓度:5μg/ml)的抗炎作用还要显著。各子馏分在两种斑马鱼急性炎症模型中显示了不同程度的抗炎作用。其中,DJ1-12、DJ13-16两个馏分在两种抗炎模型中的均表现出良好的抗炎活性,仅次于总浸膏。二萜类单体化合物在CuSO4诱导斑马鱼急性炎症模型和断尾急性炎症模型中,均表现出良好的抗炎作用。DJ-2(浓度:50μg/ml)抗炎活性最强,仅次于DEX药物组(浓度:5μg/ml)。三萜类单体化合物在CuSO4诱导斑马鱼急性炎症模型和断尾急性炎症模型中,均表现出一定的抗炎作用。
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