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目的:观察在不同模拟海拔高度及其不同缺氧时间下,急进高原缺氧对大鼠肠黏膜损伤及低氧相关蛋白EPAS1、EGLN1、PPARA表达的影响,从不同海拔高度及缺氧时间角度探讨急进高原缺氧对肠黏膜有无损伤及相关缺氧蛋白在损伤中的作用机制。方法:以Wistar大鼠为研究对象,通过低压氧舱建立不同海拔高度及不同时间点的急进高原缺氧模型。随机分为对照组(n=8)、海拔3000m组(n=24)、海拔4500 m组(n=24)、海拔6000 m组(n=24),各海拔组按不同缺氧时间分为缺氧24h亚组(n=8)、缺氧48h亚组(n=8)、缺氧72h亚组(n=8)。各组分别置于大型低压动物实验模拟舱。建立模型后,采集肠组织标本,在光学显微镜下观察肠粘膜组织病理改变,采用IHC、RT-PCR、Western Blot分别检测急性高原缺氧模型中缺氧相关基因及蛋白EPAS1、EGLN1、PPARA的表达情况。结果:(1)在不同海拔高度(3000m、4500m、6000m)和不同时间点(24h、48h、72h)的急进高原缺氧大鼠肠黏膜模型HE染色显示:高原组肠绒毛从出现水肿、脱落、排列紊乱、肠壁变薄,甚至肠绒毛两侧上皮层与固有层分离。其损伤程度随着海拔高度的升高与缺氧时间的延长而加重。(2)IHC分析同一海拔高度下不同缺氧时间的缺氧相关蛋白EPAS1、EGLN1、PPARA表达:EPAS1、EGLN1在对照组肠上皮细胞中几乎没有表达,在高原组的上皮细胞、肠组织的炎性细胞(淋巴细胞和巨噬细胞)中出现表达。PPARA在对照组肠上皮细胞中表达很弱,而在高原组有显著阳性表达,胞质成棕黄色或褐黄色,偶有细胞核中表达。分析结果表明:在相同的3000m海拔高度下,缺氧24h、48h组未见明显差异,缺氧48h、72h组差异有统计学意义(P<0.05);同一4500m海拔高度下,24h、48h、72h组两两比较具有统计学差异,且72h组>48h组>24h组>对照组(P<0.05);同一6000m海拔高度下,缺氧24h、48h组差异有统计学意义(P<0.05),缺氧48h、72h组无统计学差异。(3)RT-PCR分析在同一缺氧时间点下不同海拔高度的高原缺氧相关基因EPAS1、EGLN1、PPARA表达:在相同的缺氧24h条件下,海拔3000m、4500m组无统计学差异,4500m、6000m组具有统计学差异(P<0.05);在同一缺氧48h条件下,3000m、4500m、6000m的mRNA表达依次增强,即海拔6000m组>海拔4500m组>海拔3000m>对照组(P<0.05);在同一缺氧72h条件下,海拔3000m、4500m组具有统计学差异(P<0.05),海拔4500m、6000m组无统计学差异。(4)Western Blot分析高原缺氧相关蛋白EPAS1、EGLN1、PPARA表达:在相同的4500m海拔高度下,不同时间点的蛋白表达依次增强,即缺氧72h组>缺氧48h组>缺氧24h组>对照组(P<0.05);在同一缺氧48h条件下,不同海拔高度的缺氧相关蛋白表达依次增强,即海拔6000m组>海拔4500m组>海拔3000m>对照组(P<0.05)。结论:急进高原缺氧对大鼠肠粘膜具有损伤作用,其损伤程度随着海拔高度的升高与缺氧时间的延长而加重;缺氧相关蛋白EPAS1、EGLN1、PPARA在高原缺氧肠上皮组织中的表达与海拔高度、缺氧时间呈正相关。