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第一部分MicroRNA-21通过调节TGF-β-Smad3信号促进血管紧张素Ⅱ所致胸主动脉瘤形成的作用及其机制研究目的：验证在胸主动脉瘤中microRNA-21在病变中的变化规律,探究干预microRNA-21在胸主动脉瘤中的作用。方法：使用血管紧张素Ⅱ灌注Smad3+/-杂合子小鼠建立胸主动脉瘤模型,RT-PCR和原位杂交方法检测形成胸主动脉瘤组织中的microRNA-21表达的时空变化。同时检测临床患者中microRNA-21表达量及部位的变化。之后引入miR-21-/-:Smad3+/-双敲小鼠进行胸主动脉瘤模型复制,小鼠B超观察其血管扩张、动脉瘤形成等病变特点。组织学检测病变局部的病理特点,并检测TGF-β相关下游信号通路的活化情况。体外培养平滑肌,验证其对TGF-β的反应性。结果：在Sm-d3+/-杂合子小鼠中灌注血管紧张素Ⅱ,能够诱导杂合子小鼠发生胸主动脉瘤。并且通过RT-PCR.原位杂交方法发现,microRNA-21升高主要表达于血管中层平滑肌内。与临床标本检测的microRNA-21表达部位相符。在对microRNA-21进行敲除后,双敲小鼠产生了明显的胸主动脉瘤。并且该动脉瘤的发生快于Smad3+/-杂合子小鼠,升主动脉扩张明显,夹层发生早,破裂死亡率高。在HE、EVG切片中发现,血管直径扩张,血管中层平滑肌增厚,弹力纤维在病变局部降解。免疫组化检测发现,在双敲小鼠中,血管平滑肌中pSMAD2水平明显下降。体外实验也发现,双敲小鼠的原代平滑肌,对TGF-β的反应性明显降低,其下游靶蛋白表达同样减低。结论：在胸主动脉瘤中,microRNA-21在血管中层平滑肌中明显升高,下调microRNA-21能加重胸主动脉瘤的发生。其机制可能与平滑肌细胞中TGF-β通路受到抑制有关。第二部分SMAD7调控TGF-β信号通路与动脉瘤发生的作用及其机制研究目的：了解miR-21-/-:Smad3+/-双敲小鼠胸主动脉瘤的发病机制,通过干预Smad7缓解胸主动脉瘤发病。方法：对miR-21-/-:Smad3+/-双敲小鼠动脉瘤组织进行免疫组化、RT-PCR检测,探究平滑肌表型转换相关的收缩分子αSMA.SM22.SM-MHC,炎症因子CCL2, CXCL12,IL-6等了解血管平滑肌在动脉瘤发生时的表型转换程度。并在体外和体内利用病毒转染Smad7抑制序列解除microRNA-21敲除对SMAD通路的抑制作用,从而抑制胸主动脉瘤形成。结果：miR-21-/-:Smad3+/-双敲小鼠的胸主动脉瘤中,平滑肌细胞因为过分抑制的TGF-β通路导致发生表型转换。其表现为收缩分子aSMA、SM22、SM-MHC下调和炎症相关分子CCL2,CXCL12,IL-6上调。同时,上调的炎症分子诱导炎性细胞向病变局部趋化。当使用si Smad7慢病毒进行转染后,TGF-β信号活化水平提高,血管平滑肌表现转换得到抑制,胸主动脉瘤病变得到改善。结论：miR-21-/-:Smad3+/-双敲小鼠动脉瘤形成中,TGF-β信号降低介导的血管平滑肌表型转换是其致病的主要因素。使用慢病毒干预SMAD7蛋白表达能够抑制血管平滑肌表型转换,缓解双敲小鼠胸主动脉瘤发生。