本文以河南产连翘为研究对象,对不同加工方法加工的连翘药材进行化学评价,生物活性评价,从而优选连翘最佳产地加工工艺,并对青翘及老翘中化学成分进行对比分析,明确其药效物质基础,为连翘药材临床合理应用提供科学依据。主要研究内容分为以下四个部分:第一部分为连翘产地加工工艺研究现状调查。本部分对现有连翘产地加工工艺的记载与研究进行系统的调查与整理,发现目前连翘产地加工较为混乱,且关于连翘产地加工的研究较少,评价标准较为单一。因此有必要对连翘产地加工工艺进行综合评价研究。第二部分为连翘产地加工工艺的研究。本部分在基于前人对连翘产地加工的研究基础上,进一步对连翘的蒸制和煮制两种加工方法进行对比,并且,考虑到饮品加工企业大批量生产过程中常采用烘干法干燥饮片,因此,又对不同烘干温度进行考察,根据设计的不同加工方法加工青翘样品九批,老翘样品三批。以连翘醇浸出物、连翘苷、芦丁、槲皮素、连翘酯苷A、连翘酯苷B、α-蒎烯、β-蒎烯、对-聚伞花烃、芳樟醇含量为化学评价指标,对连翘的加工方法进行多指标化学评价。同时对水分、灰分、重金属进行检测。另外,以清除DPPH自由基活性和对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果为评价指标,对不同加工方法连翘进行生物活性评价。最终采用灰色模式识别法对其结果进行综合分析,结果表明,青翘指标性成分含量及生物活性明显优于老翘,且青翘加工品优于生品。最终确定青翘最佳产地加工方法为:蒸制10min,于60℃干燥。老翘最佳产地加工方法为:直接于60℃干燥。第三部分为连翘中化学活性成分分析。利用HPLC-MS和GC-MS分别对连翘中非挥发性成分和挥发性成分进行分析,最终,利用GC-MS研究,分析检出了连翘挥发油中100多个峰,鉴定了118种成分,占总组成的96.1%;其中烯类化合物的含量最高,占所鉴定成分含量的51.95%,醇类30.55%,酮类2.61%,烷类2.04%,酯类1.63%,醛类1.11%,酸类0.11%,杂环类0.19%,环氧化物0.27%。利用HPLC-MS研究,分析鉴定出24个化学成分,包括:奎宁酸、连翘酸-1’-O-β-D-葡萄糖苷、异连翘酸-1’-O-β-D-葡萄糖苷、马钱苷酸、连翘酯苷E、绿原酸、咖啡酸、连翘梾木苷、Secoxyloganin、橙皮苷、异连翘酯苷A、芦丁、金丝桃苷、连翘酯苷A、Plantainoside A、Caleolarioside A、山奈酚-3-O-芸香糖苷、(+)-松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷、(+)-松脂素-4’-O-β-D-葡萄糖苷、(+)-松脂素、牛蒡子苷、连翘苷、槲皮素、连翘脂素,并对化合物的质谱裂解规律进行了研究。从而对其结构鉴定、定量分析及代谢研究奠定一定的数据基础,以便从复杂体系中快速、准确地鉴别该化合物及其衍生物。第四部分为连翘对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞分泌炎症因子的影响研究。以脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7为体外炎症细胞模型,探讨连翘对LPS刺激的巨噬细胞增殖以及对释放NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的影响。结果发现青翘与老翘均有不同程度的抑制炎症因子释放的作用,青翘效果优于老翘,并呈浓度依赖性。同时采用了主成分分析、多元线性回归分析建立了连翘乙酸乙酯部位抗炎谱效关系,结果发现连翘酯苷与抗炎效应有较大的关联,是连翘抑制炎症因子释放的重要成分。同时绿原酸、咖啡酸、连翘苷等其他几种成分对抗炎作用的贡献也不容小视。表明连翘是通过其内部“有效组分群”来发挥其抗炎药效的。