本论文对鸭瘟病毒(Duck plague virus, DPV) CHv株US10基因(GenBank登录号：EU195084)进行了分子特性分析、原核表达、多克隆抗体制备、亚细胞定位、转录时相分析,主要研究结果如下：1DPV US10基因的分子特性分析DPV US10基因片段全长969bp,可编码322个氨基酸。蛋白质保守结构域分析表明该蛋白与Gene66家族的基因66(IR5)蛋白有相同的保守结构域。亚细胞定位分析表明该蛋白主要定位于细胞质中。翻译后修饰分析表明该蛋白具有5对二硫键和35个可能的磷酸化位点。该蛋白不含有信号肽和跨膜区。氨基酸系统进化树分析表明US10蛋白与马立克病毒属亲缘关系最近。US10基因密码子偏爱性较均一,且不含有2个以上连续稀有密码子串。2 DPV US10基因原核表达及其多克隆抗体制备根据CHv株US10基因的核苷酸序列,运用Oligo 7.0软件设计了一对引物对全基因进行PCR扩增,扩增片段大小为988bp,将PCR产物送大连TaKaRa公司进行T克隆,成功构建了克隆质粒pMD18-T/US10,之后通过酶切、连接等步骤构建了表达质粒pET32a(+)/US10,将此表达质粒转化入表达菌BL21进行重组蛋白诱导表达,结果发现表达产物主要以包涵体形式存在。表达蛋白的鉴定采用Western blot方法,以兔抗DPV血清为一抗,HRP标记的羊抗兔IgG为二抗,证明了表达蛋白确与兔抗DPV血清具有反应原性。通过镍柱亲和层析方法对重组蛋白进行纯化,免疫兔子制备多克隆抗体,琼脂扩散试验测定效价达到1：8。3 DPV体外感染DEF后US10蛋白的亚细胞定位分析间接免疫荧光法检测DPV US 10蛋白在DEF细胞中的分布定位,结果表明US10蛋白主要定位于细胞质中,且在病毒感染后12h检测到特异性绿色荧光,荧光强度在一定范围内随着时间的推移先增强后减弱。4 DPV体外感染DEF后US10基因的转录时相分析采用SYBR Green I荧光定量PCR法实时检测DPV体外感染宿主细胞DEF后不同时间点US10基因RNA转录情况,结果表明RNA在感染后8h可被检测到,72h达到高峰,之后转录量开始下降。药物抑制实验表明当加入工作浓度的更昔洛韦和放线菌酮后,US10基因的转录受到明显的抑制,证明US10基因具备晚期基因特征。