基于《黄帝内经》运气理论的三因司天方治疗抑郁症的实验研究

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五运六气理论是中医学“天人合一”整体观思想的集中体现。运气理论认为疾病的发生受到天地气化的影响,因此在诊治疾病时应充分考虑运气学特点。陈无择以五运六气理论为指导,制五运六气计十六方,后世应用于临床,多有奇效,成为历代医家以运气指导临床用药的代表。但目前关于运气方的研究多为临床验案的报导,缺乏系统的动物实验研究,本研究以临床常见的精神疾患抑郁症为切入点,以陈无择的三因司天方为基础,比较不同年份运气方对抑郁模型大鼠的药效作用,挖掘运气理论对于临床诊疗的重要价值,为运气方的临床使用提供科学依据。论文分为三部分:第一部分系统梳理陈氏运气方临床应用相关文献,发现研究存在的问题,基于运气理论和抑郁症治疗现状为实验设计提供合理依据。第二部分通过梳理《素问》运气七篇大论的相关论述,阐述运气变化对于疾病发生的影响及根据药物性味理论确立的治疗法则,探讨其对后世创制运气相关方剂的指导作用,重点介绍陈无择三因司天方,临床价值较高,用药遵经守旨。第三部分采用慢性不可预见性温和刺激(CUMS)联合孤养的抑郁大鼠模型,以2018年即戊戌年司天方静顺汤、2019年即己亥年司天方敷和汤为干预方药,以多种行为学实验评价不同年份运气方对抑郁模型大鼠的治疗作用,同时与临床常规抗抑郁西药和常用经典方剂柴芩温胆汤进行药效对比;应用高效液相色谱-电化学检测方法(HPLC-ECD)测定大鼠脑组织、血清单胺类神经递质及代谢产物含量的变化,探究其作用机制。实验结果如下:1实验一:戊戌年司天方静顺汤实验结果1.1静顺汤对抑郁模型大鼠行为学的影响1.1.1糖水偏好实验实验结束时(42 days),与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好指数极显著降低(P<0.01),与模型组比较,氟西汀组、柴芩温胆汤组、静顺汤组大鼠糖水偏好指数极显著升高(P<0.01)。1.1.2旷场实验实验结束时(42 days)各组大鼠在旷场中3min内穿格次数差异无统计学意义(P>0.05)。1.1.3强迫游泳实验与空白组比较,模型组大鼠强迫游泳不动时间极显著延长(P<0.01),与模型组比较,氟西汀组大鼠强迫游泳不动时间显著缩短(P<0.05),静顺汤组、柴芩温胆汤组大鼠强迫游泳不动时间极显著缩短(P<0.01)。1.1.4悬尾实验与空白组比较,模型组大鼠悬尾实验不动时间极显著延长(P<0.01),与模型组比较,氟西汀组大鼠悬尾实验不动时间显著缩短(P<0.05),静顺汤组、柴芩温胆汤组大鼠悬尾实验不动时间极显著缩短(P<0.01)。1.2静顺汤对抑郁模型大鼠不同脑区及血清单胺类神经递质及代谢产物含量的影响1.2.1前额叶皮质单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠前额皮质NE、5-HT含量显著降低(P<0.05),DA含量极显著降低(P<0.01);与模型组比较,柴芩温胆汤组的5-HT含量显著升高(P<0.05),静顺汤组DA含量极显著升高(P<0.01),5-HT含量显著升高(P<0.05)。各组大鼠前额皮质E、HVA、DOPAC含量差异无统计学意义(P>0.05)。1.2.2海马单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠海马NE、5-HT含量极显著降低(P<0.01),5-HIAA含量显著降低(P<0.05);与模型组比较,柴芩温胆汤组大鼠海马NE、DA显著升高(P<0.05),静顺汤组NE、5-HT含量极显著升高(P<0.01)。各组大鼠海马E、HVA、DOPAC含量差异无统计学意义(P>0.05)。1.2.3下丘脑单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠下丘脑DA含量显著降低(P<0.05);与模型组及柴芩温胆汤组比较,静顺汤组DOPAC含量极显著升高(P<0.01)。各组大鼠下丘脑NE、5-HT及代谢产物含量差异无统计学意义(P>0.05)。1.2.4血清单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠血清5-HT、5-HIAA含量极显著降低(P<0.01);与模型组比较,柴芩温胆汤组大鼠血清5-HT含量显著升高(P<0.05),静顺汤组大鼠血清5-HT、5-HIAA含量极显著升高(P<0.01)。与柴芩温胆汤组比较,静顺汤组大鼠血清DA、5-HIAA含量显著升高(P<0.05)。2实验二:己亥年司天方敷和汤实验结果2.1敷和汤对抑郁模型大鼠行为学的影响2.1.1糖水偏好实验实验结束时(42 days),与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好指数极显著降低(P<0.01),与模型组比较,氟西汀组、柴芩温胆汤组、敷和汤组大鼠糖水偏好指数均极显著升高(P<0.01)。2.1.2旷场实验实验结束时(42days),与空白组比较,模型组大鼠穿格次数极显著减少(P<0.01);与模型组比较,柴芩温胆汤组、静顺汤组、敷和汤组大鼠穿格次数均值明显增加但差异无统计学意义(P>0.05)。2.1.3强迫游泳实验与空白组比较,模型组大鼠强迫游泳不动时间均值有增加趋势,与模型组比较,各给药组差异无统计学意义(P>0.05)。2.1.4悬尾实验与空白组比较,模型组大鼠悬尾实验不动时间极显著延长(P<0.01),与模型组比较,氟西汀组、柴芩温胆汤组、敷和汤组大鼠悬尾实验不动时间极显著缩短(P<0.01)。静顺汤组大鼠悬尾实验不动时间显著缩短(P<0.05)。2.2敷和汤对抑郁模型大鼠不同脑区及血清单胺类神经递质及代谢产物含量的影响2.2.1前额叶皮质单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与模型组比较,静顺汤组大鼠前额叶皮质DA含量显著升高(P<0.05),柴芩温胆汤组、敷和汤组大鼠前额叶皮质5-HT含量均极显著升高(P<0.01),氟西汀组、静顺汤组大鼠前额叶皮质5-HT含量显著升高(P<0.05),敷和汤组均值高于其余各给药组。2.2.2海马单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠海马5-HIAA含量极显著降低(P<0.01);与模型组比较,敷和汤组大鼠海马5-HT含量显著升高(P<0.05),且均值高于其余各给药组。2.2.3下丘脑单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与模型组比较,静顺汤组、敷和汤组大鼠下丘脑DA含量显著升高(P<0.05),柴芩温胆汤组大鼠下丘脑5-HT含量显著升高(P<0.05)。与柴芩温胆汤组比较,静顺汤组、敷和汤组大鼠下丘脑E含量均显著升高(P<0.05)。2.2.4血清单胺类神经递质及代谢产物含量的变化与空白组比较,模型组大鼠血清E、5-HT含量显著降低(P<0.05),HVA含量极显著降低(P<0.01);与模型组比较,柴芩温胆汤组、静顺汤组、敷和汤组大鼠血清5-HT含量均极显著升高(P<0.01),柴芩温胆汤组大鼠血清HVA、5-HIAA含量极显著升高(P<0.01),静顺汤组大鼠血清5-HIAA含量显著升高(P<0.05)。分析实验结果,得出以下结论:(1)静顺汤在2018年即太阳寒水司天之戊戌年,改善CUMS应激诱导的大鼠抑郁样行为作用较柴芩温胆汤组更明显,静顺汤相对于理气化痰之柴芩温胆汤更切中病机,其发挥作用的机制可能与提高模型大鼠前额叶皮质的DA、5-HT水平、海马的NE、5-HT水平及血清的5-HT水平有关。(2)敷和汤在2019年即厥阴风木司天之己亥年改善CUMS应激诱导的大鼠抑郁样行为作用较其余各组更为明显,其发挥作用的机制可能与提高前额叶皮质、海马及血清的5-HT水平、下丘脑的DA水平有关。(3)静顺汤和敷和汤均在当年运气条件下表现出较好的治疗效果,疗效略优于常规抗抑郁西药和中药,结合运气用药的治疗效果一定程度优于常用经典方剂,提示了五运六气对于疾病发生的影响,根据运气特点指导临床用药有其现实意义。
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