从MMP-3/TIMP-3视角探索化纤系列方Ⅴ号方与艾灸防治肺纤维化的疗效及其生物学机制

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:smalleye
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目的:观察比较艾灸与自拟化纤Ⅴ号方对博莱霉素A5诱导肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制剂-3(TIMP-3)表达的影响,并探讨艾灸与化纤Ⅴ号方阻逆肺纤维化的疗效及其作用机制。  方法:100只SD大鼠,雌雄各半,体重为200±20;随机分为四组,包括空白组、模型组、艾灸组、化纤Ⅴ号方组;空白组10只;其他组各30只;采用国际上通用的博莱霉素 A5(BLMA5)制作大鼠肺纤维化模型(博莱霉素气管内灌注法制作大鼠肺纤维化模型)。艾灸组造模7天后开始给予治疗,取“肺俞”、“膏肓俞”穴,左右交替施灸。每天一次,10次为1疗程,共治疗3个疗程,疗程间休息2天;化纤Ⅴ号方组用提前熬制好的汤液进行灌胃;空白组,模型组,除常规抓取固定、生理盐水灌胃外,不予其他疗法治疗;各组与治疗后的第7,14,30天随机各处死8只大鼠取肺组织。肉眼观察大鼠一般情况,观察肺表面颜色,HE染色观察肺纤维化程度;实时荧光定量-PCR(RT-PCR)比较分析各组第30d的MMP-3/TIMP-3的表达;Western blot检测MMP-3的蛋白表达。  结果:(1)与空白组比较,模型组各时间段大鼠一般情况不断恶化;给予治疗后,化纤Ⅴ组和艾灸组较模型组好(P<0.05或P<0.01);(2)空白组肺组织MMP-3蛋白表达量最高,模型组30d时MMP-3蛋白表达量与其他三组比较最低(P<0.01)。艾灸组30d时与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。化纤Ⅴ组与模型组比较差异不明显(P>0.05)。(3)空白组TIMP-3蛋白有少量表达,模型组TIMP-3与对照组比较差异显著(P<0.01)。艾灸组TIMP-3第30d时与模型组比较有显著降低(P<0.01)。化纤Ⅴ组TIMP-3与模型组比较差异明显(P<0.05)。  结论:(1)艾灸组与化纤Ⅴ组通过提高MMP-3,降低TIMP-3在肺纤维化中的表达,对大鼠PF有不同程度的改善,以艾灸组作用最明显,艾灸与化纤Ⅴ号方之间差异不显著;(2)各治疗组间通过调节MMP-3/TIMP-3在PF中的比值,从而改善肺纤维化程度;(3)中药化纤Ⅴ号方在抗肺纤维化中作用不明显,化纤Ⅴ号方的方药配伍主要是针对气阴两虚咳喘型肺纤维化作用明显,因此对博莱霉素 A5诱导的以肺虚络阻、痰阻血淤为主证的肺纤维化作用不明显。中医在防治PF上,重点应该通过对证型的把握和辨证论治上。
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