【摘 要】
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目的 研究大黄素(Emodin)对人肝癌细胞smmc-7721的作用及探讨其诱导人肝癌细胞smmc-7721凋亡的分子机制。 方法 肝癌细胞smmc-7721经药物处理后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色还
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目的 研究大黄素(Emodin)对人肝癌细胞smmc-7721的作用及探讨其诱导人肝癌细胞smmc-7721凋亡的分子机制。 方法 肝癌细胞smmc-7721经药物处理后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色还原法观察大黄素对肝癌细胞株smmc-7721细胞生长的抑制作用;普通显微镜、荧光显微镜观察细胞形态学的变化、DNA凝胶电泳、流式细胞仪(FCM)分析诱导凋亡作用;采用免疫印迹法(Western blot)检测p53、p21蛋白水平变化,采用细胞免疫化学(immunocytochemistry)方法检测Fas的表达变化。 结果 与对照组相比,大黄素能明显抑制smmc-7721细胞的生长且呈浓度、时间依赖性,其IC50(48h)为(49.6±0.03)μmol/L。大黄素处理肝癌细胞后,普通光学显微镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡形态学改变;荧光显微镜观察示肝癌细胞胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞核可见新月型改变,固缩或片段化的核;DNA凝胶电泳可见典型的梯状条带(DNA ladder);流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,流式细胞仪定量分析示20、40、及60μmol/L浓度下细胞凋亡率分别为(6.67±0.27)%、(14.81±0.86)%、
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