四君子汤为治疗脾虚证的经典方,由人参、白术、茯苓、炙甘草4味药组成。前期四君子汤药效物质基础研究表明,多糖是四君子汤物质基础的重要来源之一,且获得免疫活性多糖。为溯源活性多糖,开展如下研究:首先依据复方免疫多糖制备方法,分别分离得到2个人参均一多糖RS-3-1、RS-3-2,3个白术均一多糖BZ-3-1、BZ-3-2、BZ-3-3,1个茯苓均一多糖FL-3-1和1个甘草均一多糖GC-3-1。分子量范围在5.42×10⁴-5.65×10⁴ Da之间。组成单糖种类包括Rha、Ara、Xyl、Man、Glc和Gal,但各自摩尔比不同。采用经典途径抗补体及巨噬细胞RAW264.7考察多糖免疫活性。结果显示,各多糖组分和均一多糖具有抗补体活性。其中,BZ-3-1活性最高,CH₅₀为0.482mg/mL。同时RS-3-1、BZ-3-1、FL-3-1、GC-3-1能增强巨噬细胞吞噬作用,促进其NO释放量,提高肿瘤坏死因子（TNF-α）水平（p<0.05）。采用GC-MS,红外光谱,甲基化,高碘酸氧化和Smith降解,核磁共振波谱,进一步对活性较好的均一多糖RS-3-1、BZ-3-1、FL-3-1和GC-3-1进行了结构表征。与前期得到的复方四君子汤免疫活性多糖S-3-1比较,证明复方免疫活性均一多糖S-3-1可能不是来源于单味药而是复方煎煮过程中产生。本文旨在溯源四君子汤复方免疫活性多糖,致力于四君子汤单味药多糖的结构和免疫活性研究,为四君子汤的临床药用提供支持依据。但复方四君子汤多糖免疫活性物质基础研究仍有许多未明之处,还需要更全面完善的免疫作用机制与构效关系研究。