中国拟青霉(Paecilomyces sinensis)菌丝体糖肽的分离纯化及活性研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a84242936
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
冬虫夏草是我国的传统中药,中国拟青霉(Paecilomyces sinensis)是冬虫夏草中分离的一个无性型菌株,并且中国拟青霉在形态学、药理学及化学成分方面与天然冬虫夏草非常相似。本研究从中国拟青霉中分离出了具有生物活性的大分子均一糖肽,并对其结构、生物活性进行了研究。  本课题采用液体发酵法得到中国拟青霉菌丝体,干燥后的菌丝体通过水提醇沉法提取,分离除蛋白后得到分子量均一的糖肽粗品CPS-Ⅰ,其糖含量为71.3%。凯氏定氮法检测了CPS-Ⅰ蛋白质含量为19.1%。CPS-Ⅰ通过葡聚糖凝胶分离纯化之后得CPS-Ⅱ。通过高效液相色谱、核磁共振氢谱、炭谱、红外光谱等分析检测CPS-Ⅱ,检测结果表明CPS-Ⅱ为一种大分子糖肽。通过旋光仪测得其比旋光度+35°,表明不对称性比较低。应用高效液相色谱、气相色谱、红外光谱和核磁共振、高碘酸氧化和Smith降解、甲基化等方法测定CPS-Ⅱ一级结构,结果表明CPS-Ⅱ主要以1→3、1→4连接葡萄糖和半乳糖为主链,还有1→2,3,6连接葡萄糖,1→3,6连接甘露糖,1→6连接半乳糖。圆二色谱法分析糖肽构象得出:中国拟青霉菌丝体糖肽能与刚果红发生络合,是具有(+) cotton效应的α-螺旋结构,含有较多的螺旋、转角结构。  采用MTT法评价了CPS-Ⅱ细胞抗肿瘤活性,应用DPPH法和Fenton法检测了CPS-Ⅱ的抗氧化性。结果表明CPS-Ⅱ对HepG2细胞的半抑制浓度(IC50)为526μg/mL;CPS-Ⅱ清除DPPH·的能力为18.2%,CPS-Ⅱ浓度为0.1mg/mL时羟基自由基清除率为17.2%。  本文首次从中国拟青霉菌丝体中分离出糖肽,并进行了结构表征和生物活性评价。丰富了虫草生物活性物质的研究内容。
其他文献
未折叠蛋白应答(UPR)是真核细胞应对内质网压力而产生的一种自动调节机制。在诸多疾病中都存在内质网稳态失调现象。越来越多的研究也发现了UPR应答分子在各类癌症中的失常表
元宝山冷杉是松科冷杉属的常绿针叶乔木,是世界上仅产于广西中部元宝山的珍稀濒危植物。在国家公布的首批珍稀濒危保护植物中,它被列为一级保护的濒危植物,并于1998年被IUCN“针
本文通过对荣华二采区10
期刊
腺病毒(Ad)载体以其高效感染众多种类细胞而作为基因运输载体在人类基因治疗中广泛用。然而,大多数人群体内存在固有腺病毒抗体并且在首次注射腺病毒载体后迅速产生大量免疫中
翻白草学名:Poterntilla discolor Bge,英文名:Discolor Cinquefoil Herb,蔷薇科委陵菜属多年生草本植物。具清热解毒、消炎镇痛、抗菌、抗病毒、降血糖等功能,在临床上多以翻白草的水煎剂用作内服药,如治疗出血性疾病,阿米巴痢疾等;或者结合其它中药水煎剂治疗风湿麻木瘫痪、筋骨久痛、风瘫、癫痫等。本文对翻白草的有效成分、药理作用和临床应用等方面的研究进行分析归纳
活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的产生存在于生物体的众多生理病理过程中。大量的实验数据表明,活性氧还参与到了细胞凋亡和程序性坏死的进程里。丁基羟基苯甲醚(Butylat
成熟的胚胎是植株个体的雏形,胚胎发生是形成植株的基础。多年来,人们对影响植物胚胎发生的相关基因进行了研究。其中一些基因参与胚胎早期的形态建成,这些基因功能各异,它们参与