有机氮源与发酵工艺对林可霉素生物合成的影响

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本课题主要研究了菌种、培养基中有机氮源和发酵工艺对林可霉素生物合成的影响。  菌种复壮方面,通过在含有0.04%的谷氨酰胺平板中反复传代纯化,最终得到S-13,效价稳定在4900 u/mL左右。  研究不同黄豆粉和玉米浆膏粉对林可霉素发酵的影响,发现黄豆粉中氨基酸含量高更有利于林可霉素的合成,氨基酸含量高的黄豆粉和氨基酸含量低的黄豆粉比较,其效价提高23.4%;发酵培养基使用玉米浆与效果最差的玉米粉相比效价高出28.4%。  在丙二酸和稀土元素的添加研究中发现,在96 h添加60 mg/L的丙二酸与对照相比提高11.6%。稀土元素中,氯化铕在144 h,添加10 mg/L时效价提高9.6%,氯化铯在72 h,添加20 mg/L时效价提高5.6%。在氨基酸添加中,24 h添加60 mg/L组氨酸,效价提高6.3%;半胱氨酸最优添加时间为0h,浓度为40 mg/L,效价提高10.9%。甲硫氨酸在0h添加120 mg/L,效价提高14.8%。经过组合添加研究发现最优组合为60 mg/L的组氨酸、20 mg/L的半胱氨酸和120 mg/L的甲硫氨酸,效价提高16.4%。  15L罐上放大实验中,组合添加条件罐放罐效价达到8928 u/mL,甲硫氨酸添加罐放罐效价达到7817 u/mL,对照罐为6051 u/mL。组合添加条件罐较添加甲硫氨酸条件罐效价提高了18.4%,较对照罐提高47.5%,而且组合添加条件罐中lmbG、mshA和egtD基因表达量基本都高于对照罐和甲硫氨酸添加罐,在144 h达到最大。
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