IFN-γ和IL-10基因多态性与儿童噬血细胞综合征的研究

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噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)又称为噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH),是一种非常严重的、危及生命的淋巴组织细胞增生综合征。HLH最常累及婴幼儿,主要临床表现为持续性发热、肝脾肿大、肝功能异常、两系或以上的外周血细胞减少、低纤维蛋白原血症、高甘油三酯血症等,病情进展迅速、危及生命。HLH发病率较低,诊断缺乏特异性指标,早期诊断、尽早治疗是提高疗效的关键所在。研究证实高炎症性细胞因子大量释放导致的细胞因子风暴是HLH最重要的病理生理因素。尤其是血清干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)在病程早期即显著增加,在HLH的发病中起关键作用,对HLH的早期诊断亦有重要的价值。研究显示IFN-γ和IL-10的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与其血清水平相关,并与多种炎症免疫性疾病的发病和预后密切相关,但与HLH发病的相关性目前尚未见到相关报道。本研究回顾性分析徐州市儿童医院2011年1月至2014年12月40例诊断明确的HLH患儿的临床特征、家族史、治疗和预后情况,为了解国内HLH患儿的诊治现状情况提供一定的参考。同时本研究首次分析IFN-γ基因+874A/T,+2109A/G,以及IL-10-1082G/A基因多态性与HLH血清IFN-γ和IL-10的浓度以及HLH发病的关系,为识别HLH的发病危险因素和协助早期诊断提供新的思路。第一部分HLH患儿应用HLH-2004诊断标准和治疗方案临床病历分析目的:通过40例HLH患儿的临床病历分析,探讨儿童HLH的临床特征、发病危险因素、实验室特点以及采用HLH-2004方案治疗的疗效和预后情况。方法:回顾性分析2011年1月至2014年12月徐州市儿童医院收治的40例HLH患儿的临床资料。诊断标准和治疗方案按照国际组织细胞协会HLH-2004方案。结果:40例HLH患儿中,男性24例,女性16例。发病中位年龄为1岁(区间范围为4月~10.5岁)。2例患儿有明确家族史,27例患儿有明确的诱因,13例未找到明确病因。主要临床表现为发热、肝脾肿大、出血、肺浸润、胸腔积液、中枢神经系统病变、皮疹等。实验室检查有血细胞减少、肝功能异常、凝血异常、高甘油三酯血症、铁蛋白升高,骨髓可见噬血细胞。35例患儿采用HLH-2004方案治疗,存活27例,死亡13例。死亡原因主要为感染、弥散性血管内凝血和多脏器衰竭。结论:儿童HLH病情凶险、临床表现复杂,尽早采用HLH-2004方案进行诊疗。第二部分IFN-γ和IL-10基因多态性与儿童HLH的研究目的:探讨IFN-γ+874、+2109和IL-10-1082位点基因多态性与儿童HLH的易感性的关系。方法:本研究共纳入40例徐州市儿童医院诊断的HLH患儿,160例年龄、性别相匹配的健康儿童为正常对照组。应用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定HLH患儿和正常对照组儿童的血清IFN-γ和IL-10水平;应用等位基因特异性聚合酶链反应(ASPCR)测定法分析HLH患儿和正常对照组儿童IFN-γ基因+874、+2109和IL-10-1082位点的基因型;并测序进行认证。结果:1、与正常对照组相比较,HLH组患儿的血清IFN-γ和IL-10浓度显著高于正常对照组,两组比较有显著统计学差异,P<0.001。2、与正常对照组相比较,HLH患儿的IFN-γ+874A/T和T/T基因型频率显著高于正常对照组,P<0.001,有显著统计学差异;IFN-γ+874位点T等位基因频率亦显著高于正常对照组,P<0.001。HLH患儿的IL-10-1082G/A基因型显著高于正常对照组,P<0.001,IL-10-1082位点G等位基因的频率亦显著高于对照组,P<0.005。HLH患儿的IFN-γ+2109G/A基因型频率的分布与正常对照组比较,没有显著性差异。3、进一步分析IFN-γ基因+874A/T,+2109A/G,以及IL-10-1082G/A基因多态性与HLH血清IFN-γ和IL-10浓度的关系,结果显示IFN-γ+874T/T基因型患儿血清IFN-γ的浓度显著升高;不同IFN-γ+2109G/A基因型与IFN-γ的血清水平没有显著性差异。IL-10-1082G/A基因型患儿血清IL-10水平显著升高。结论:IFN-γ+874 A/T,T/T,IL-10-082G/A基因多态性与HLH的发病有关,与HLH存在遗传易感性。
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