固相反应器在线氧化流动注射分析法研究

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大多数药物是具有共轭结构的有机大分子,易发生氧化还原反应,有时经过反应可使其分子结构共轭体系增大,使得一些本身不具有荧光的物质在氧化后产生荧光,或者一些弱荧光物质的荧光强度增强;一些不具有颜色的药物分子经过氧化后也可能转变为在可见区有吸收的物质。本文将二氧化铅、磷酸铁氧化剂制成固相反应器,通过流动注射在线氧化对叶酸和盐酸氯丙嗪两个体系的分析特性进行了研究,建立了两个组分的新的分析方法,并应用于药物含量的测定、溶出度测定以及药物与蛋白相互作用的研究。 论文分两部分,即综述和研究报告。 第一部分:无机试剂固定化及其在流动注射分析中的应用 从物理吸附、聚合包埋、化学沉积以及化学键和四个方面对无机试剂固定化方法、技术及其在流动注射分析中的应用进行了综述。 第二部分:研究报告 包括两个分析体系。 一、流动注射固相反应器在线氧化荧光法叶酸分析体系研究 具体包括: (一)流动注射固相反应器荧光法测定药物中叶酸含量 该方法以聚合包埋固定的二氧化铅氧化柱作为固相反应器在线氧化叶酸,根据叶酸的氧化产物具有强荧光这一性质,在磷酸缓冲介质中,80℃恒温水浴中加热,建立了流动注射二氧化铅固相反应器荧光法测定叶酸含量的新方法。该方法具有线性范围宽(8×10-9~2.5×10-6g/mL)、灵敏度高(1.0×10-10g/mL),测量精密度高(11次平行测定的相对标准偏差为0.85%)的特点。将方法应用于两个厂家生产的叶酸药片中叶酸含量的分析,实验结果与标准方法基本吻合。 (二)流动注射固相反应器在线过滤稀释荧光法测定叶酸片的溶出度 在上述测定叶酸含量新方法的基础上,结合流动注射在线过滤稀释技术建立了流动注射在线过滤稀释固相反应器荧光法测定叶酸片溶出度的新方法。在线过滤稀释简化了手工操作,实现了溶液的自动补偿以及整个测定过程的自动化。应用与两个不同厂家的叶酸片测定,所得结果与标准方法基本一致。 (三)流动注射透析分离固相反应器荧光法测定人体血浆中叶酸的研究 人体血浆中含有大量蛋白,这些蛋白质对叶酸的测定会产生干扰。本文应用自制的透析分离器将蛋白质与叶酸分离,对三个不同人血浆样中叶酸的含量进行了测定,同时进行回收率试验,回收率为95.5%一108%。 二、流动注射固相反应器在线氧化荧光法盐酸氯丙啧分析体系研究 具体包括: (一)流动注射固相反应器荧光法对药物中盐酸氯丙嚓含量的测定 利用二氧化铅在线氧化盐酸氯丙嗦为强荧光物质,建立了流动注射固相反应器荧光法测定盐酸氯丙啧的新方法。在常温条件下,以HCI作为介质,5 cm的二氧化铅氧化柱作为固相反应器,测定的检出限为1.6xl0.99/mL,线性范围为lx10一8一4xlo一6创mL,11次平行测定的相对标准偏差为1.6%,分析频率为60瓜。对两个不同厂家生产的盐酸氯丙嗦片剂和针剂中盐酸氯丙嗦含量进行测定,结果与对照结果基本一致。 (二)流动注射固相反应器在线过滤稀释荧光法测定盐酸氯丙嗦药片溶出度 在上述实验基础上,将流动注射与在线稀释过滤技术结合在药典规定的溶出条件下固相反应器荧光法测定盐酸氯丙嗦片溶出度。结果表明盐酸氯丙嗦片在44min时己溶解到70%以上,符合药物溶出的国家规定。 (三)流动注射固相反应器荧光法研究盐酸氯丙嗦与蛋白相互作用 利用自制的透析分离器将蛋白以及结合药物的蛋白大分子和游离药物小分子分离,研究盐酸氯丙嗦与蛋白的相互作用,结果表明盐酸氯丙嗦与牛血清蛋白为非特异性结合,根据Scatchard方程求得盐酸氯丙嗓与牛血清蛋白的结合常数为k一22.6又103(mol·L一’)一’。 (四)磷酸铁固相反应器在线氧化光度法测定盐酸氯丙嗓 盐酸氯丙啧本身无色,但其氧化物在可见光区有吸收。以磷酸铁为氧化剂在线氧化盐酸氯丙嗦为有色物质,建立了磷酸铁固相反应器在线氧化光度法测定其含量的新方法。该方法的检出限为1.8xl0一6留mL,在sxlo一6一lxlo礴g/mL范围内有良好的线形关系(r=0.998)。H次平行测定的相对标准偏差为1 .78%。方法应用于药物制剂中盐酸氯丙嗦分析,结果满意。
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