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黄瓜霜霉病是由古巴假霜霉病菌[Pseudoperonospora cubensis(Berk.& Curt.)Rostov]引起的,是世界范围内黄瓜主要叶部病害之一。由于黄瓜遗传基础狭窄,霜霉病抗性资源有限,至今国内外育种者仍然不能很好地解决黄瓜霜霉病抗性问题。本文以含有霜霉病抗性基因酸黄瓜整套染色体组的远缘杂交双二倍体新种Cucumis hytivus为材料,与栽培黄瓜回交、自交,通过抗性筛选、形态学、细胞学和分子标记综合鉴定,选育出了黄瓜抗霜霉病原初异源易位系CT-01,对其高代自交系进行跟踪鉴定,分析了其遗传稳定性。利用AFLP标记对易位系的系统演化进行了研究。设计特异引物,分离出了抗霜霉病相关基因cpc-1。以高代易位系CT01R为亲本配制组合,选育出了加工专用型新品种‘宁佳3号’。 1.黄瓜异源易位系选育的相关技术和机理研究 研究了普通黄瓜根尖、组培芽体细胞染色体制片技术。通过采用合适的预处理药剂,获得了较长的根尖细胞中期染色体;在预处理方法上以低温(0℃)结合0.002mol·L-1 8-羟基喹啉处理4-4.5h,和以2.5%混合酶液于25℃下解离4-4.5h可获得较好的组胚芽染色体制片。 用改良的染色方法和染色体制片技术对普通黄瓜花粉母细胞(PMCs)减数分裂过程及雄配子体发育过程进行了较为系统的研究,结果表明,黄瓜减数分裂属于同时型胞质分裂,双线期染色体具有明显的交叉节并呈现出较易识别的棒状或环状形态,在末期Ⅰ和末期Ⅱ有多核仁和核仁融合现象;雄配子体发育过程中观察到两核居中期的特殊现象,在核居中期小孢子只有一层壁,而在核靠边期小孢子出现了两层壁;黄瓜的成熟花粉粒属于两核花粉粒。 在黄瓜高代自交系花粉母细胞减数分裂过程中,首次观察到了微核仁现象。微核仁在PMCs中数目变化范围在1.7之间。从细线期到四分孢子期都可观察到微核仁,其数量和大小在分裂的不同时期有所差异,但在第一次和第二次减数分裂时期内的变化趋势相似。在微核仁的周期性变化过程中,染色体的行为正常,并没有发现染色体畸变或染色体桥等现象。微核仁的发生不受季节和栽培环境的影响。 利用上述有丝分裂和减数分裂的染色体制片技术,对远缘杂交原初二倍体杂种F1和经体细胞染色体自然加倍的双二倍体新种Cucumis hytivus的细胞遗传学进行了研究。结果表明,种间杂种F1的PMCs减数分裂终变期和中期Ⅰ有较多的二价体和多价