【摘 要】
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目的:以四妙勇安汤为例,探讨中药复方用半仿生提取(SBE)的研究方法.方法:首先用正交设计,以藁苯内酯、挥发油、萃取物为指标成分,优选当归挥发油的超临界流体萃取(SFE)工艺条
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目的:以四妙勇安汤为例,探讨中药复方用半仿生提取(SBE)的研究方法.方法:首先用正交设计,以藁苯内酯、挥发油、萃取物为指标成分,优选当归挥发油的超临界流体萃取(SFE)工艺条件;然后用正交设计,以绿原酸、阿魏酸、甘草酸、总多糖、醇浸出物、干浸膏为指标成分,分别优选非挥发性药效物质的SBE、水提取(WE)、乙醇提取(EE)的工艺条件;最后分别以化学成分指标、药理效应指标、血清HPLC指纹图谱对3种方法的提取液进行比较,综合评判3种提取方法的优劣,确定最优工艺.结果:GC-MS检出的SFE萃取物与水蒸气蒸馏提取挥发油的主要成分基本相同,挥发油、藁苯内酯的提取率分别为水蒸气蒸馏法的1.62倍、1.90倍;优选出的SFE工艺条件为:当归粉碎成过4目筛粗粉,在30MPa、65℃条件下萃取2 h,分离Ⅰ条件:12MPa、40℃,分离Ⅱ条件:6MPa、40℃,验证试验结果表明SFE工艺条件稳定可行.SBE液的6种指标成分的综合评分值最高,抗炎、降低血液粘度、抑制血小板聚集、提高SOD活力、降低MDA含量等药理作用最强;SBE液、WE液、EE液给药后2 h血清的共有峰重叠率、相似度差异较小, LC-MS检测出的10个特征峰的分子量相同,SBE液、WE液给药后5h血清的特征峰数量未发现变化,但EE液的特征峰明显减少,提示某些成分在体内消除速度快,药效维持时间短.综合评判结果:SBE工艺优于WE工艺、EE工艺,四妙勇安汤的非挥发性药效物质以用SBE工艺条件提取为佳,即药材粉碎成过4目筛的粗粉,分别加20％乙醇提取3次,溶剂用量依次为10、8、8倍,pH值依次为3.50、7.50、8.50,提取时间依次为1.5、1.0、1.0 h;验证试验结果表明SBE工艺条件稳定可行.结论:该研究将化学成分指标、药效指标、血清指纹谱有机的结合起来进行SBE工艺研究,既优选工艺条件,又优选工艺路线.因此,"SBE法"既符合中医药本原理论,又能充分融合现代科学技术和手段,是对中药提取思路与方法的拓展和创新,该论文进一步丰富和完善了中药复方用SBE法提取的研究设计思路与方法.
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