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第一部分RCC1在肺腺癌中的表达及对其预后与功能的影响目的:在如今的中国,肺癌仍是发病率与死亡率最高的癌症种类之一,非小细胞肺癌是肺癌中最常见的类型。染色体浓缩调节因子（Regulator of chromosome condensation 1,RCC1）是Ras相关核蛋白（Ran）蛋白上的鸟嘌呤核苷酸交换因子,具有参与细胞增殖调亡、细胞周期以及核质间物质交换等多种生物学功能。在本部分研究,我们主要探索RCC1在肺癌中表达水平以及对预后的影响,并研究RCC1在体外对肺腺癌细胞的增殖凋亡影响。方法:在TCGA数据库中下载并分析人类多种癌种的mRNA的表达数据;在Oncomine数据库验证RCC1在Lung Adenocarcinoma（LUAD）和Lung squamous cell carcinoma（LUSC）中的mRNA表达,在HPA数据库中进一步验证RCC1在LUAD组织中蛋白质的表达水平;在Kaplan-Meier plotter、Prognoscan和TISIDB三个数据库中分别分析了RCC1的表达水平与肺癌患者生存预后的关系;用siRNA抑制A549与H1299两种肺腺癌细胞株中RCC1的mRNA与蛋白质水平的表达,并用q RT-PCR与WB验证RCC1的表达水平;CCK-8实验检测A549与H1299细胞的增殖能力,流式细胞术检测A549与H1299细胞的凋亡比例。结果:在TCGA与Oncomine数据库中发现RCC1的mRNA表达在肺腺癌与肺鳞癌中均较对应的正常组织高,在HPA数据库中发现RCC1在肺腺癌组织中蛋白质表达也较正常肺组织高;通过生存分析发现,RCC1的高表达与肺癌患者的预后差有关;用两组siRNA序列抑制了A549与H1299两种肺腺癌细胞株中RCC1在mRNA与蛋白质的表达水平;RCC1低表达能抑制A549与H1299肺腺癌细胞的增殖能力,并增加肺腺癌细胞的凋亡比例。结论:RCC1在肺腺癌组织中呈现高表达水平,并与肺腺癌患者的预后差有关。RCC1能促进肺腺癌细胞增殖,有促进肺腺癌发生发展的功能。第二部分RCC1对肺腺癌细胞中下游分子p27kip1/CDK4/PD-L1表达水平的影响目的:RCC1能催化RanGDP向RanGTP的转化,从而调控核质间的物质交换,对下游分子产生影响。本部分研究中,我们探索RCC1对下游分子p27kip1/CDK4/PD-L1表达水平及免疫细胞浸润的影响。方法:用siRNA抑制A549与H1299两种肺腺癌细胞株中RCC1的表达水平后,q RT-PCR、WB检测p27kip1/CDK4/PD-L1的mRNA与蛋白质的表达水平。在TISIDB数据库中分析了RCC1的表达水平与免疫细胞浸润的关系。结果:RCC1低表达时p27kip1的mRNA与蛋白质表达水平在两株肺腺癌细胞系中均有增高;CDK4的mRNA表达水平在两株肺腺癌细胞系中均略有增高,A549细胞系中增高程度较H1299细胞系明显,但在蛋白质表达水平中均有一定程度的下降。PD-L1的mRNA表达水平仅在H1299细胞系肺有增高,A549细胞系中变化不明显,在蛋白质表达水平在两株肺腺癌细胞系中均有显著增高。在TISIDB数据库中,我们发现RCC1表达水平与大部分免疫细胞浸润程度呈反比。结论:RCC1能在蛋白质水平通过p27kip1/CDK4轴改变PD-L1的表达水平。RCC1的高表达与免疫细胞浸润减少、PD-L1表达水平有关,RCC1或可以作为免疫治疗疗效的预测标志物。第三部分RCC1低表达联合PD-L1单抗对lewis小鼠肺癌抑瘤作用的研究目的:服用PD-L1单抗取得良好疗效的患者中,PD-L1的表达阳性率均较高。在体外实验中发现RCC1低表达能在提高PD-L1的蛋白质水平。本部分研究中,我们探索RCC1低表达与PD-L1单抗联用是否能增加抗肿瘤作用。方法:建立shRNA-RCC1慢病毒稳转Lewis肺腺癌细胞株,在C57BL/6J小鼠上构建肿瘤模型,并用PD-L1单抗处理,检测记录肿瘤增殖能力;用免疫组化检测模型中RCC1,p27kip1,CDK4,PD-L1的变化。结果:抑制RCC1表达后,我们发现肿瘤的增殖能力减弱;在联用PD-L1单抗后,发现较仅用PD-L1单抗能进一步抑制肿瘤的生长速度;在体内实验中,我们也进一步证明了RCC1低表达能通过p27kip1/CDK4轴增加PD-L1的表达。结论:RCC1低表达联用PD-L1单抗较仅用PD-L1单抗有更好的抑瘤作用,能通过p27kip1/CDK4轴调节PD-L1的丰度来增强免疫检查点抑制剂（ICIs）治疗的疗效,为PD-L1表达阴性或ICIs效果欠佳的患者提供了一个新的治疗方向。