【摘 要】
：
目的探讨桂皮醛(Cinnamaldehyde,CA)预处理能否通过自噬途径减轻缺氧复氧导致的H9C2心肌细胞损伤。方法实验采用大鼠H9C2心肌细胞进行常规体外培养,取对数生长期细胞予以缺氧2h/复氧4h处理,模拟心肌缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)建立缺氧复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)损伤模型。选取浓度0μM-100μM桂皮醛分别对细胞进
论文部分内容阅读
目的探讨桂皮醛(Cinnamaldehyde,CA)预处理能否通过自噬途径减轻缺氧复氧导致的H9C2心肌细胞损伤。方法实验采用大鼠H9C2心肌细胞进行常规体外培养,取对数生长期细胞予以缺氧2h/复氧4h处理,模拟心肌缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)建立缺氧复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)损伤模型。选取浓度0μM-100μM桂皮醛分别对细胞进行2h、4h、6h预处理,利用细胞活力检测试剂(Cell counting kit-8,CCK-8)检测H/R后各组细胞活力,确定最佳给药浓度和给药时间,后续实验均采用这一条件进行给药处理;酶标法检测CA对H/R心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)漏出率的影响;以3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)为自噬抑制剂和雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)为自噬增强剂,将细胞随机分为五组:正常对照组(Sham组)、缺氧复氧组(H/R组)、桂皮醛组(H/R+CA组)、抑制剂组(H/R+3-MA组)、激动剂组(H/R+Rapa)组;利用单丹磺酰戊二胺(Monodansylcadaverine,MDC)荧光染色试剂盒观察H/R诱导各组细胞自噬体的聚集情况,检测各组细胞的平均荧光强度;采用Hoechst33342荧光染色法观察H/R后各组细胞核的形态变化,并计算细胞凋亡率;Westernblot检测蛋白Beclin-1、LC3II/LC3I、P62以及Bax/Bcl-2的表达。结果1、CA预处理对心肌细胞H/R损伤的影响与Sham组相比,细胞上清液中LDH水平升高(P<0.01);与H/R组相比0μM-100μM桂皮醛处理2h、4h、6h后,细胞活力均有不同程度的升高,且在预处理时间6小时、给药浓度60μM达到峰值;LDH检测结果显示60μM桂皮醛预处理6小时后,上清液中LDH释放量较H/R组明显降低(P<0.01)。2、MDC自噬荧光检测和Hoechst33342荧光检测结果与Sham组相比,H/R组细胞自噬荧光强度升高(P<0.01),细胞凋亡率上升(P<0.01);与H/R组相比,H/R+CA组细胞平均荧光强度显著降低(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01);与H/R组相比,H/R+3-MA组细胞平均荧光强度显著降低(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01);与H/R组相比,H/R+Rapa组细胞平均荧光强度升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。3、Westernblot检测相关蛋白结果与Sham组相比H/R组Beclin-1蛋白表达增加(P<0.01),LC3II/LC3I蛋白表达增加(P<0.01),P62蛋白表达减少(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白比值升高(P<0.01);与H/R组相比,H/R+CA组Beclin-1蛋白表达减少(P<0.05),LC3II/LC3I蛋白表达减少(P<0.01),P62蛋白水平升高(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白比值降低(P<0.01);与H/R组相比,H/R+3-MA组Beclin-1蛋白表达减少(P<0.01),LC3II/LC3I蛋白表达减少(P<0.01),P62蛋白表达升高(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白比值显著降低(P<0.01);与H/R组相比,H/R+Rapa组Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05),LC3II/LC3I蛋白表达增加(P<0.05),P62水平进一步降低(P<0.05),Bax/Bcl-2蛋白比值升高(P<0.05)。结论桂皮醛预处理可以提升H/R后的细胞活力、降低LHD水平减轻H/R造成的H9C2心肌细胞的损伤,并且抑制了H/R诱导的心肌细胞的过度自噬,减轻了细胞凋亡。
其他文献
妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)为妊娠前糖代谢正常或有潜在糖耐量减退、而在妊娠后才出现或确诊的糖尿病。糖尿病孕妇中80%以上为GDM,其在我国发生率有逐年增高趋势。GDM婴儿早期过敏性疾病高发,可能与婴儿肠道菌群紊乱及免疫平衡的改变密切相关。母乳中的聚糖类(包括低聚糖﹑蛋白聚糖等)是塑造婴儿肠道菌群的重要因素,而肠道菌群对婴儿的免疫发育及免疫平衡有
高级氧化技术（Advanced oxidation processes,AOPs）在处理难降解有机物方面具有高效性、普适性和彻底性等特点,已成为难生物降解废水处理领域的一个热点研究课题。其体系中高活
百里杜鹃风景名胜区是国家级风景名胜区,以原生性杜鹃花大面积集中分布而享誉全球,有“地球彩带,杜鹃王国”之美誉。但多年来景区森林植被类型与空间分布格局不明,观赏植物组成、季相特征与空间分布格局不清,景观美景度特征不详,不利于景区科学规划与合理管理。本研究基于景观生态学基本原理,以森林群系为基本类型,以观赏植物多样性及物候特征为基本内容,通过系统性的调查研究,分析和揭示百里杜鹃风景名胜区的景观美景度及
甘油三酯在肝脏的异常积累导致非酒精性脂肪肝(NAFLD),是目前最常见的肝病[1]。NAFLD的发病进程由最初的脂肪变性到非酒精性肝炎(NASH),再到肝硬化肝纤维化,最后到肝细胞癌(HCC),对健康生活存在着巨大的威胁[2]。胆汁酸核受体FXR在胆汁酸代谢、糖代谢和脂质代谢中有重要的作用,据报道FXR激动剂对NAFLD具有治疗作用[3-6]。中药因其对代谢性疾病良好的疗效受到广泛的关注。中药五味
翁方纲是清代著名诗学家,他的诗学成就很高。本文即从翁方纲的论诗诗入手,分析他的论诗诗特色、诗学观、诗歌风格以及论诗诗中的作家批评,从而更加深刻地剖析翁方纲在论诗诗中传递的诗学思想与他所要传递给后世的文学精神。第一章主要阐释翁方纲论诗诗创作的文学背景。首先对论诗诗的发展流变做一个简单地归纳、概括,从而梳理翁方纲论诗诗的创作时期;同时探究翁方纲论诗诗的创作原因,对研究翁方纲的论诗诗形成一个完整的逻辑系
目的观察针刺结合益气健脾中药复方对糖尿病胃轻瘫(Diabetic gastroparesis,DGP)大鼠的作用效果,通过检测其对胃排空率、小肠推进率及RhoA-ROCK信号通路、p-MYPT1、p-MLC蛋白的影响,探究其影响DGP大鼠胃肠动力的作用机制,为DGP的治疗提供更好的方法和依据。方法采用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)尾静脉注射及高糖高脂不规则喂养法制备DGP模型,将成
基于节能环保、资源节约以及轻量化等的需要,Cu/Al管广泛应用于制冷等工业领域,探索一种Cu/Al管间高效可靠的连接技术一直是研究的热点和难点。本文结合磁脉冲成形、半固态成
随着经济的发展与社会的进步,工业化和城镇化已然成为当下我国的时代特征。大量农村人口来到城市、欠发达地区的居民来到发达地区,以寻求更多的发展机遇,试图改变自身命运。流动人群的到来,为城市进步注入强大的发展动力,带来了丰富的人力资源,然而也引发了诸多社会问题,在一定程度上阻碍了我国现代化进程。城市社区是流动人群社会融入的过渡站,是与他们的生活联系最为紧密的社会化场所。与此同时,城市社区作为整个社会的缩
目的比较一次性球囊宫颈扩张器和缩宫素静滴在宫颈不成熟的足月单胎头位初产妇引产中的临床应用效果,探讨一次性球囊宫颈扩张器在宫颈不成熟足月引产中的应用价值。方法1.随
随着中国工业的迅速发展,电镀、制革、印染等行业产生大量含铬废水和含铬固体废弃物,通过大气沉降、废水排放、淋滤等方式进入环境导致土壤和地下水的污染。环境中的Cr主要以Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)两种价态存在,其中Cr(Ⅵ)是一种毒性和迁移性都很强的污染物,还原固定是一种常见的Cr(Ⅵ)治理方法。纳米零价铁(NZⅥ)作为一种强吸附性和强还原性物质,是一种常见的还原固定材料,但是NZⅥ易团聚,易氧化等缺陷限制