本课题以人血清白蛋白(HSA)为载体、以叶酸(FA)为靶向基团,制备了具有肿瘤靶向效果的羟基喜树碱靶向纳米粒(FA-HSA-Nano-HCPT-NPs)。该羟基喜树碱制剂粒径及粒径分布较小,在体内外均具有较好的缓释效果及肿瘤细胞靶向性。制剂制备过程中,首先利用反溶剂法将粒径较大的羟基喜树碱原药粉微粉化,使其转化为平均粒径低于1000 nm的羟基喜树碱微粉。再利用高压均质技术将所得到的羟基喜树碱微粉制备成纳米粒度的羟基喜树碱。实验优化得到均质过程的最佳条件为:药物浓度0.5 mg·mL-1,均质压力为80 MPa,15个循环;得到纳米羟基喜树碱平均粒径为67.9±4.3nm,粒径分布范围为61.2nm到78.3nm;经X-射线衍射法(XRD)检测显示其结晶化程度与羟基喜树碱原粉相比较低;经傅里叶红外光谱检测仪(FT-IR Spectrometer)检测得,该方法制得的纳米羟基喜树碱与原药相比,纳米化前后羟基喜树碱的官能团并未发生明显改变。然后利用反溶剂法及表面包覆技术,以偶联叶酸的人血清白蛋白为载体,制备羟基喜树碱纳米粒(FA-HSA-Nano-HCPT-NPs)。实验得到最优制剂工艺如下:羟基喜树碱浓度、羟基喜树碱与人血清白蛋白质量比、反应时间、80%乙醇用量及pH值分别为0.33 mg·mL-1、1:10、18 h、37 mL及pH = 6.2。经激光粒度仪、Zeta电位分析仪检测,FA-HSA-Nano-HCPT-NPs的平均粒径为197.2 ± 2.6 nm,粒径分布范围为174.6 nm到238.5 nm,表面电位为-27.43 ±2.14 mV。由此可见,该方法制备得到的FA-HSA-Nano-HCPT-NPs平均粒径较小、其粒径分布均匀,表面电位适中,该纳米粒在水溶液中性质较稳定,不易聚集。采用扫描电子显微镜对FA-HSA-Nano-HCPT-NPs表面形态进行观察,结果显示,其粒径小、分布均匀,与激光粒度仪检测结果一致,该纳米粒呈球形及椭球形,表面光滑,并且没有粘连。利用X-射线衍射技术对FA-HSA-Nano-HCPT-NPs的结晶化程度进行了检测,结果显示,该纳米粒处于不定形态。利用透析法考察了 FA-HSA-Nano-HCPT-NPs的体外释放情况,结果显示FA-HSA-Nano-HCPT-NPs 在 PBS 中的最初 8 h 出现了 HCPT 的暴释,累积释放量达到总量的41.4%;随后缓慢释放至96 h,累积释放量大于75%,经软件分析发现,该药物传递系统符合希古切(Higuchi)方程(y=-0.26 e(-x/7.46)-8.50e(-x/1752.34)+8.80(R2 = 0.999))。该药物传递系统具有很好的缓释型。利用MTT法及流式细胞技术考察了 FA-HSA-Nano-HCPT-NPs的体外抗肿瘤效果及其对肿瘤细胞周期阻滞情况。FA-HSA-Nano-HCPT-NPs显示出较HCPT羟基喜树碱原粉更强的体外抗肿瘤活性。流式细胞仪分析结果显示FA-HSA-Nano-HCPT-NPs阻滞细胞周期在G2/M,FA-HSA-Nano-HCPT-NPs与羟基喜树碱原药抑制肿瘤细胞的周期阻滞情况相同,可见制剂将HCPT携带进入细胞,释放出的HCPT在发挥作用。制剂的体内抗肿瘤活性评价是采用了接种人乳腺癌细胞株(MCF-7细胞)的裸鼠,给药剂量为8 mg HCPT· kg-1体重。结果FA-HSA-Nano-HCPT-NPs对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制效果强于相同剂量的市售羟基喜树碱注射液及拓扑替康,在裸鼠体内显示了很好的抗肿瘤效果。药物组织分布情况显示,FA-HSA-Nano-HCPT-NPs给药组中,肿瘤的药物浓度远远高于羟基喜树碱HCPT组;而羟基喜树碱组中,心、肺、脾、肾中的药物浓度均高于叶酸羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒组。由此可见,该药物传递系统对在老鼠体内对MCF-7细胞具有很好的靶向性。生物利用度实验结果显示,在静脉给药过程中,叶酸羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒较羟基喜树碱(HCPT)在老鼠体内驻留时间更长,生物利用度更高。综上所述,本论文制备了叶酸羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒(FA-HSA-Nano-HCPT-NPs),具有粒径小、粒径分布均一的特点,在水溶液中具有很好的稳定性。该药物传递系统在体内外均具有一定的缓释效果,体内实验表明,该药物传递系统提高了羟基喜树碱的生物利用度,具有很好的肿瘤靶向性。