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支持细胞(Sertoli cells,SCs)是维持睾丸免疫豁免功能的重要体细胞,主要通过形成血睾屏障(BTB)、高表达FasL、分泌免疫抑制因子(如TGF-β、IL-1、 IGF-Ⅱ等)来实现其免疫豁免功能。肿瘤坏死因子(TNF)属TNFSFL家族成员,包括TNF-α和TNF-β两种类型,睾丸中主要分泌的是TNF-α。TNF-α通过与SCs上的受体结合,影响SCs分泌功能,调节FSH诱导的SCs生精功能和SCs参与的BTB的开闭及SCs免疫调节因子的分泌,进而影响SCs的各种功能。但目前TNF-α是调节SCs中Fas/FasL系统的表达的机制还不完善。本研究的目的是探索TNF-α对SCs中Fas/FasL的表达的影响以及调节Fas/FasL表达的分子机制。本研究以体外培养的仔猪睾丸SCs为研究材料,用TNF-α处理培养的SCs,采用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测TNF-α对SCs增殖的影响,利用流式细胞术检测TNF-α对SCs周期进程的变化和细胞早期凋亡的影响；用Western blot和荧光定量PCR技术检测Fas/FasL、MMP-2/MMP-9和TIMP-2/TIMP-1蛋白水平及其mRNA丰度表达的变化；然后利用ELISA试剂盒检测TNF-α对IL-1β、IL-6、IGF-1、 TGF-β1等细胞因子表达的影响。实验结果发现：(1)用不同浓度的TNF-α(0.1、1、10、25、 50、100、200ng/mL)处理SCs不同时间(6、12、24、36、48、72h)后,SCs的增殖活力具有浓度和时间依赖性,其作用效果在浓度为50ng/mL、作用时间为36h时最强,细胞的增殖活力最低,极显著抑制了SCs的增殖,促进了细胞的凋亡(P<0.01)；(2) TNF-α (50ng/mL)显著促进了Fas/FasL蛋白水平及mRNA的表达(P<0.01)；(3) TNF-α (50ng/mL)显著促进了MMP-2/MMP-9蛋白和mRNA的表达(P<0.05)；(4) TNF-α(1ng/mL)显著促进TIMP-1mRNA的表达(P<0.01),TNF-α (50ng/mL)极显著降低TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达(P<0.01)；(5)TNF-α(50ng/mL)促进了IL-1β和IL-6和分泌,抑制了IGF-1和TGF-β1的分泌(P<0.05)。总之,TNF-α通过促进细胞促炎性因子IL-1p、IL-6的分泌,抑制TIMP-1和TIMP-2的表达,增强MMP-2和MMP-9的表达,加强Fas/FasL的表达,并通过Fas/FasL系统促进了细胞的凋亡,降低了细胞的活率。另外,TNF-α在诱导促炎性因子分泌的同时,也抑制了促生长因子IGF-1和TGF-β1的分泌,因此,促进了对SCs的凋亡和损伤。