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本文对水稻重要害虫—二化螟Chilo suppressalis幼虫的优势寄生蜂二化螟盘绒茧蜂Cotesia chilonis个体发育及其对寄主的免疫影响进行了研究,取得以下结果:
一、二化螟盘绒茧蜂的个体发育
二化螟盘绒茧蜂卵属于膜翅日型,卵表面无附属物。二化螟盘绒茧蜂幼虫具有膜翅目细腰亚目幼虫的典型特征。根据幼虫的头宽、体长、腹宽,幼虫可分为3龄。蛹期分为2个阶段:第一阶段呈幼虫状,第二阶段形态裸蛹状,其蛹体表各部分的着色顺序依次为:复眼-单眼-下颚-胸-腹-触角。
二、二化螟盘绒茧蜂主要寄生因子特征初步研究
实验表明二化螟盘绒茧蜂的寄生因子除了毒液以外,还有另外重要的寄生因子:多分DNA病毒和畸形细胞。毒液中大部分蛋白的分子量集中在25-240KDa范围内。PDVs粒子是典型的茧蜂病毒,卵萼内的病毒粒子外被一层单位膜,在膜内可含有一个或多个核衣壳,病毒粒子以细胞裂解的方式被释放到雌蜂萼腔中,成熟的病毒粒子一般呈圆柱状,长度变化很大,中间为高度浓缩的核质。起源于寄生蜂浆膜细胞的畸形细胞呈球形或椭圆形,释放到寄主血淋巴中后,随着寄生日龄的增加,体积迅速增大,畸形细胞的表面有大量微绒毛存在。
三、二化螟盘绒茧蜂寄生对寄主免疫的影响
与同期未被寄生幼虫相比,寄生幼虫血细胞总量要高于对照;寄生幼虫的血细胞延展率除第2d外均低于对照;寄生幼虫的血细胞的死亡率除第5d外均高于对照;寄生幼虫的血细胞的噬菌能力低于对照;寄生幼虫血细胞的包囊能力降低,并且在1~5d时达到显著性差异。寄生幼虫血细胞的酚氧化酶活性升高,并且在1~2d时达到显著性差异。寄主二化螟幼虫血淋巴黑化作用受到了一定程度的抑制,血淋巴的抑菌能力降低。
四、二化螟盘绒茧蜂毒液和卵萼液对二化螟幼虫主要免疫反应的影响
借助显微注射实验技术手段,对四龄幼虫的二化螟幼虫进行体外注射,研究二化螟盘绒茧蜂毒液和卵萼液对二化螟幼虫的主要免疫反应是否有影响。研究表明:注射寄生蜂毒液和卵萼液以后二化螟幼虫血腔中的血细胞数量是增加的,而血细胞的延展率是明显降低的,死亡率是明显升高的,包囊能力也呈下降趋势,但是只有前2天存在显著性差异,后来这种差异消失,而酚氧化酶的活性是呈上升趋势的,不过基本不存在显著性差异。通过体外实验我们也可以看出,二化螟盘绒茧蜂毒液和卵萼液对二化螟幼虫离体血细胞的延展能力、死亡率和包囊指数也可以产生影响。
五、二化螟不同地区种群免疫相关指标的比较
对采自8个地区的二化螟种群分别进行免疫相关的指标测定,发现二化螟不同种群在血细胞数量、包囊能力、酚氧化酶活性和可溶性蛋白含量等指标上多存在显著差异。对二化螟不同种群免疫相关指标进行对应分析,将不同地区二化螟分成4个类群:(1)以浙北和苏南为代表的浙江安吉、江苏扬州和高淳种群;(2)以浙西和赣中为代表的浙江富阳和龙游以及江西宜黄种群;(3)以浙中盆地为代表的浙江金华种群;(4)以华中地区为代表的湖北武汉种群。二化螟不同种群在免疫能力上的差异可能与其种群的遗传结构以及生存环境有关。